小中大Q: 所谓的黑胶虫污染?
A:培养细胞发现小黑点现象很严重,原来对“黑胶虫”一说嗤之以鼻,认为那不过是自欺欺人的借口,觉得怎么也不会发生在自己身上。但是真的就碰上了:细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。
上述现象很像所谓的“黑胶虫”。
我感觉实际是支原体感染以后细胞生长不好造成的碎片和感染原虫(现在看来是些胞外囊泡)的混合体。这种现象的直接原因是支原体等原虫感染,间接表象是小黑点,被以讹传讹成为了“黑胶虫”。
光镜下看不到支原体,但是可以看到支原体感染的终末现象——细胞凋亡坏死,释放出大量碎片,看起来就像小黑虫子。
查找类似的帖子——很多人是更换血清后出现这种问题;
说空气传播的可能是一个培养箱的人都用了同一种血清,而不是可以通过培养箱空气传播;感染最可能是牛源性的支原体,通过产道或血行感染。
所谓“细胞生长不受影响”,其实是污染的严重程度不高而已;
支原体污染严重就出现细胞大量空泡形成,细胞间空旷地带出现大量黑点,细胞最终凋亡、坏死,漂起来。有些国产血清写着建议灭活,其实是挂羊头卖狗肉,那个56度30分钟更多的是为了杀杀支原体的。实际上还有很多杀不死的。但可以降低产品支原体等微生物污染风险。用阿奇霉素杀支原体,小黑点可以得到抑制,不过我想根治就很难了,而且处理时间很长,至少一个星期。
以上是自己个人总结的一点看法。建议不要总拿子虚乌有的“黑胶虫”来说事。多考虑看不到的支原体,不要还停留在培根时代——只相信自己眼睛看见的。