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标题:【求助】想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分

qinqinai[使用道具]
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【求助】想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分

请教大家,我的样品共100ul,有三百多个这样的样品,其中含有大量的不挥发性无机盐,想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分,如何将盐类除掉不影响质谱的检测得到好的数据呢?谢谢大家。
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xiaoxiaojinglin[使用道具]
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【回复】

可以用固相萃取小柱,把每个样品过一遍
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aaby[使用道具]
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【回复】

样品数目太多了,而且过柱子会不会损失太大呀
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p1900[使用道具]
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【回复】

盐是没有保留的,可以把刚从色谱柱洗脱的部分切换到废液中不进质谱,等快到所测成分的保留时间时再切换进质谱,我们这样进过几千个培养液样品都没问题。不过如果样品的保留时间较短的话盐可能会影响药物的峰形,如果不能接受的话可以考虑梯度会改善一些
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886爱[使用道具]
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【回复】

可以告诉我大概盐在多长时间能除干净吗?有没有具体的实例说一下来参考?
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【回复】

我测得时候在所用的色谱柱及流速下T0为0.7min左右,我把1min前的流动相都切换到废液了,每个batch一百多个样品都没有问题
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n111[使用道具]
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【回复】

想请教一下,您的样品中盐多不多呢,我的是HBSS缓冲盐溶液,盐非常多,我已经把样品冻干,想在进样的时候用甲醇流动相溶解有效成分并除去盐分,这样做有必要吗?还是直接进样就可以呢?
如果不用上述步骤,色谱柱的使用在我的实验中主要的目的就是除去盐分,是不是可以选择很短的柱子以便节省进样时间,您有没有这方面的经验,样品走梯度好还是等度好呢?
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xiaoxiaojinglin[使用道具]
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【回复】

我的多数样品都是0.1 M的PBS,有时是DMEM培养基,没有冻干,直接加2倍体积的乙腈,涡旋离心取上清进样。用纯甲醇复溶可以去除盐分,但是使用短柱子的时候会导致色谱峰非常宽,有时甚至产生肩峰甚至双峰。柱子可以选尽可能短的,我用过5cm的快速分离柱。梯度很费时间,如果等度的峰形、精密度什么的还可以的话就不要用梯度了
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大花猫bb[使用道具]
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【回复】

多谢您指教,我没有做过三重四级杆,所以不是很懂,你也是用的质谱定量吗?你说的峰宽和肩峰是HPLC还是质谱的离子流图?这种峰产生的原因是溶解样品没有使用流动相的原因吗?想和你交流一下,如果仅仅使用1cm的预柱会不会更好一些呢?
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妮子@[使用道具]
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【回复】

我用的三重四级杆测得,肩峰是色谱图上的,跟用什么检测器无关,是没用流动相溶解样品溶剂扩散导致的。不建议仅使用1cm的预柱,因为生物样品中除了盐含还有其它成分,容易对质谱测定产生基质效应
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