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标题:【求助】MTT实验

dreaming[使用道具]
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【求助】MTT实验

实验测的OD值好多都是一点几或二点几,所有的都是统一操作,是被污染了吗?OD多高为宜,求指教
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66小飞侠[使用道具]
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前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好,但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱,作用时长有很大的关系,可以设计一个空白实验看看,祝好~
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bongte[使用道具]
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不是细胞多了 就是污染了,污染的可能很大,一般细胞孔长满了也就1多点
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dreaming[使用道具]
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不是细胞多了 就是污染了,污染的可能很大,一般细胞孔长满了也就1多点

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中板的时候好像密度中大了,投毒前就几乎长满了!细胞太多也会使OD偏高?也就是说不是只被污染才会偏高对吧!
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dreaming[使用道具]
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前辈们说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好,但是我觉得OD值的大小也和药物的作用强弱,作用时长有很大的关系,可以设计一个空白实验看看,祝好~

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我想问一下,就是投毒前不是要把先前的培养液吸出来吗,我直接只用一个枪头吸出所有的孔内液体,这样可以吗?
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kswl870[使用道具]
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在MTT检测时实际上要求细胞大概能长满96-孔板的80-90%,细胞繁殖速度快,OD值也会相对偏大一些,MTT作用一段时间后,再吸出所有液体加DMSO,这时也不必要更换吸头,依次吸取就可以了,没事的
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biabiade[使用道具]
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中板的时候好像密度中大了,投毒前就几乎长满了!细胞太多也会使OD偏高?也就是说不是只被污染才会偏高对吧!
...

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是的啊,MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔
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dreaming[使用道具]
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是的啊,MTT一般的标准是初始接种量1w个/孔,...

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初次做,还不熟,要么种太多,要么种太少了,呵呵!
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vtongli[使用道具]
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96孔板种8000   空白浓度过高就种6000  主要是看你的药物处理几天~
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