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标题:[求助]新手上路，用什么提DNA模板比较好？

米西11米西[使用道具]
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发表于 2011-10-22 14:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]新手上路，用什么提DNA模板比较好？

[求助]新手上路，用什么提DNA模板比较好？



标本DNA模板提取怎么提？现在比较普遍应用的方法是不是用裂解液？还是用蛋白酶K?有没有现成的购买还是需要自己配制？（菜鸟问题勿见笑）
希望得到朋友们的回答，您的举手之劳将是对我莫大的帮助，谢谢！
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发表于 2011-10-22 14:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
普通的酚/氯仿抽提法就可以了，效果应该还蛮好的！
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##蒙奇奇[使用道具]
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发表于 2011-10-22 14:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般都是用酚抽提，如果需要可以发个我们实验室提家蚕DNA的PROTOCOL给你。

[ 本帖最后由 ##蒙奇奇 于 2011-10-22 14:20 编辑 ]
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发表于 2011-10-22 14:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以用生物公司的试剂盒（要看你从哪种标本提：如组织还是血液？），但是与自己陪液比较贵一点！本人就是从宝生物买的试剂盒，从人血液100微升中提到1微克左右DNA，当然还有其他的试剂盒！试剂盒价钱不是特别贵，适合一些非生化专业或新手，提取过程简单易行！效果还可以！
自己抽提也可以，省点票票！
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米西11米西[使用道具]
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发表于 2011-10-22 14:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
首先谢谢大家的建议：）我是非生化专业的新手，需要抽提微生物（支原体）的DNA,请youngdoctor98 推荐一下什么样的试剂盒，叫什么名字
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987789[使用道具]
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发表于 2011-10-22 14:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
宝生物公司网站上有，cuturl('www.takara.com.cn')
好象是DV810A是小量纯化试剂盒
我没用过此试剂盒，我丛人血液中提的。你可以打个电话问问最好！0411-87641681
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米西11米西[使用道具]
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发表于 2011-10-22 14:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在用不是很新鲜的血液提取DNA,是用肝素抗凝的,是我从检验科收到的标本,请问因为血液标本不新鲜，有无什么好的提取方案,感激不尽
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发表于 2011-10-22 14:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室用煮沸法,效果不错.先加裂解液,再煮沸.因为这种小生物的细胞器少,所以这样处理就差不多可以用做模板了.
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发表于 2011-10-22 14:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DNA的提取是分子生物操作的第一步，这一步的工作如果做不好，其影响将延续到以后各个步骤，所以这一步液是分子生物操作当中最重要的一步，值得商榷。本人认为采取何种提取方法主要考虑两方面的因素：一要考虑提取得到的目的片断的大小；二要考虑提取得到的DNA的纯度。
对于支原体而言，因为它没有细胞壁，所以破碎细胞相对比较容易。如果要求目的片断比较大，建议使用蛋白酶K法提取，否则可以用碱裂解法提取。两种试剂都需要购买然后自己配制。
如果要求目的片断纯度比较高，建议使用试剂盒，比如V-gene的细菌基因组DNA抽提试剂盒比较好用，其产物可以直接用于PCR、酶切等分子操作。价格也可以承受。而且挺适合新手操作的。
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菠萝菠萝蜜[使用道具]
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 小中大
你好
你做过支原体吗？你能把你的方法详细说一下吗？
我要做支原体的pcr不知用什么方法提DNA好。
请指教！
你加的是什么裂解液？
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