小中大Promega公司试剂盒从全血中抽提DNA:
1. 取EP管作标记后加入0.9ml 细胞裂解液(cell lysis solution),并颠倒数次使solution挂壁。
2. 取充分融化的全血0.2ml 轻轻混匀后,室温放置25min,其间颠倒2-3次。
3. 离心,13000rpm, 3min。
4. 弃上清, Vortex, 充分振荡20s,使沉淀物与余下液体能混合。
5. 加入0.3ml核裂解液,反复吹打至固体沉淀完全悬浮,液体混浊。之后 37℃ 放置30min。
6. 加入0.1ml蛋白沉淀,充分混合,使蛋白完全沉淀。
7. 离心,13000rpm, 3min.
8. 转移上清于另一干净EP管中,加入0.3ml异丙醇,充分混合。
9. 离心,13000rpm, 3min.
10. 弃上清,70%乙醇洗两次。
11. 弃上清后,室温下干燥15-20min.
12. 待完全干燥后,加入DNA 溶解液0.1ml,65℃水浴中溶1.5-2h.
13. 电泳确定后,测OD 260 OD 280 值判断含量和浓度。
14. 4ºC保存,备用。
读研时,也自己配过细胞裂解液,现在配方忘了,我查了以后再告诉你。