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标题:[求助]有谁能帮我查查吗？

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发表于 2011-10-22 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]有谁能帮我查查吗？

[求助]有谁能帮我查查吗？


我在一篇文章中看到别人做的乳酸杆菌L.brevis(L1.2028)的分泌性信号肽,但我在Genebank中怎么都查不到,我现在也想做这方面的工作,请各位大虾帮帮忙,能否提供其信号肽的全序列或链结,在此先谢过了.
下面是那篇原文标题 : hCGβ在乳酸杆菌中的分泌性表达
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发表于 2011-10-22 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
搞定！
下面是PUBMED的链接：
cuturl('http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.fcgi?val=43966&itemID=1&view=gbwithparts')

部分内容：
sig_peptide 1..90
/citation=[1]
/evidence=experimental
ORIGIN
1 atgcaatcaa gtttaaagaa atctctttac ttgggccttg ccgcattgag ctttgctggt
61 gttgctgccg tttcaacgac tgcttcagct aagtcatacg ctactgcagg tgcctattca
121 acgttaaaga cggacgctgc tactcgtaac gtcgaagcta ctggtactaa cgctttatac
181 acgaagccag gtactgttaa gggtgctaag gttgtcgctt ctaaggctac tatggctaag
241 ttagcttctt caaagaagtc agctgactac ttccgtgctt acggtgttaa gaccactaac
301 cgtggttcag tttactaccg tgttgtaacg atggatggca agtaccgtgg ttacgtttat
361 ggtggcaagt ctgacactgc ctttgctggt ggtatcaagt ctgctgaaac gactactaag
421 gctgatatgc ctgcacgtac tactgggttc tacttaactg acacttcaaa gaacactctt
481 tggacggctc ctaagtacac tcaatacaag gcaagtaaag ttagccttta tggtgttgct
541 aaggacacca agtttactgt agatcaggct gctactaaga ctcgtgaagg ttcattatac
601 tatcacgtaa ctgctactaa cggtagtggt attagtggtt ggatttacgc tggtaagggc
661 ttcagtacta ctgctactgg tacacaagta cttggtggtc tgtcaactga taagtcagtt
721 acagcaacca acgataacag tgttaagatt gtttaccgta cgactgatgg cactcaagtt
781 ggttctaaca cttgggtaac ttcaactgat ggtacaaagg caggttctaa ggtaagcgat
841 aaggccgccg atcaaactgc tcttgaagcc tacatcaatg ctaacaagcc tagcggttac
901 actgtaacta accctaatgc tgcagatgct acctatggta acacagttta cgctactgtt
961 tcccaagcag ctacttctaa ggtcgctttg aaggtctcag ggactcctgt tactactgca
1021 ttgactacag ctgatgctaa tgataaggtt gcagctaacg ataccactgc taatggtagt
1081 tctgttgcag gctcaacagt ctatgctgct ggtactaagt tggctcaatt aacaactgac
1141 ttgactggtg aaaagggtca agttgtcaca ttaactgcca tcgatactga tttggaagac
1201 gctacgttca ctggaactac gacttactat tcagatcttg gtaaagcata ccactacact
1261 tacacttaca ataaggacag tgctgcttct tcaaatgcaa gtacccaatt tggttcaaac
1321 gtcactggta ctttaactgc tacccttgtt atgggtaagt ctactgctac tgctaacggt
1381 actacttggt tcaactaa
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发表于 2011-10-22 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
今天将你给的序列与我查的那篇文章上的序列进行了比较，发现它并不是你给序列上的一部分，不知道是什么原因，你能给出合理的解释吗?谢谢
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发表于 2011-10-22 17:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一个问题：
今天做PCR时着急了一下，没有等10*buffer完全溶解就开始加，结果没有一个有结果，电泳显示引物二聚体很深，同样的反应体系以前的实验有结果，怀疑是不是buffer没有完全溶解的原因，请教高手指点，谢谢！
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发表于 2011-10-22 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不会是，buffer是一种混合物，尽管没有完全融解，但融解部分的成分应该是均一的。
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发表于 2011-10-22 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得也不是buffer的问题，我做的时候buffer一直都是融解一点用一点的，扩增效果也很好。
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发表于 2011-10-22 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
再请教一下，其他的如Taq酶等，是不是要等完全溶解再加，否则会影响结果？盼赐教，谢！！！！
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yonger[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Taq酶我也是融化一点用一点，没有必要完全融化再用。其他的dNTP引物等也不用全部融化。再就是，新买的药品你可以分装一部分用，否则一旦污染就全部用不成了。
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花裙子[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
除了水之外，其他的试剂都应该完全溶解，否则会导致试剂内各成分不均，会影响试验结果的。  
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爆炸头[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Taq酶没有必要完全融化再用。其他的试剂还是完全融化以后再用为好.
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