小中大我现在正在作实时荧光定量PCR，我谈一下自己的看法，希望能对你有帮助：
1. 厂家作的标准品是用来作标准曲线的，标准曲线有两个用途：
a.给出你的体系的扩增效率，因为曲线有截距和斜率，并且给出你的扩增效率。
b. 通过标准曲线，软件可以给出你的样品的copy数。
2.我已经请厂家给我的RT-PCR扩增产物做标准品了，还要B-actin做外参么？
B-actin的用途是使你的结果归一化，也就是说保证你所提取的模板是从相同的细胞数中提取的，和标准曲线是有区别的，所以B-actin还是要作的。
3. 现在资料显示：B-actin也不是那么稳定，我们现在都在用GAPDH进行归一化。
