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标题:【求助】求高人指点Bandscan及Qantity one分析结果！

gmjghh[使用道具]
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发表于 2016-4-9 09:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的是第一种方法，在一开始黄色的框是框到了包括所有我要的条带了，当然也有很多背景框到了。然后我滑动右边的鼠标减少选中框，但当减少到我要的条带框也即将被去除时仍有少数几个背景框存在，所以我当时就确保我要目的条带框中之外，也留下了少数几条背景框在我所要的泳道内了。
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发表于 2016-4-9 09:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
RT-PCR后琼酯糖电泳后半定量分析,各位觉得可靠吗?
既然RT-RCP了,为什么不引物小点,来个real-time 呢?岂不更可靠?
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发表于 2016-4-9 09:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

定量PCR毕竟不好做，价钱也比较贵，而且不少地方连定量PCR仪器都没有。我们实验室有人做了都半年了也没有好的结果。万事开头难啊。而且我觉得有些做半定量有很大的差异的话也足够说明问题吧。
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hdmi[使用道具]
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发表于 2016-4-9 09:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用电泳图像进行半定量分析，我想有几个关键点还是要控制好的：
1.用已经有这定量结果的样品一起PCR后电泳作标准曲线；如果没有，梯度稀释的DNA也可以给出一些相关的提示，从理论上讲，半定量可能只是在一个浓度范围内有效，即标准曲线的有效浓度范围。
2.确保每次照样的参数保持一致。因为半定量就 是计算一个灰度值或者积分光密度值，受影响的因素非常多，甚至你连续分析两次都会有差异。
因此，半定量的结果可能只供参考。
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