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标题:【求助】SCX阳离子固相萃取小柱

大嘴猴[使用道具]
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【求助】SCX阳离子固相萃取小柱

在看资料,接触到了固相萃取小柱,用于净化蜂蜜样品以提取蜂蜜样品中的硝基咪唑类物质。但是,我缺少理论背景知识,所以看不懂这样操作的原因,希望有人能帮忙解答。
取10g蜂蜜,用0.1mol/L的盐酸溶液10mL溶解蜂蜜样品(为何用盐酸溶解蜂蜜,而不用水), 加磷酸氢二钾15g(为何加入磷酸氢二钾,是调PH吗?), 振荡使其溶解,再用二氯甲烷20mL重复提取2次,盐酸20mL反萃(何为反萃,为何用盐酸反萃,作用是什么),过阳离子交换柱,先用甲醇、水各5mL淋洗柱子,再用磷酸溶液( pH2)5mL活化(甲醇和水无法活化柱子吗?柱子是以硅胶为基质的),上样,然后用水3mL淋洗交换柱,除去样品中的水溶性物质,如糖类等,最后采用pH8.8的0. 5mol/L的磷酸盐缓冲液20mL洗脱(洗脱原理?),洗脱液经过二氯甲烷20mL萃取,旋转蒸干后定容,使用高效液相色谱仪测定。
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兔子[使用道具]
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【回复】

硝基咪唑类物质在酸性条件下溶解性比较好;
调pH使目标化合物以分子状态存在,便于萃取;
反萃去除酸性性杂质;
离子交换柱与C18等不同,需要酸性环境进行活化;
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mimima[使用道具]
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【回复】

吸附的是碱性物质,所以需要在碱性环境下才能交换出来,所谓离子交换原理。
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qinqinai[使用道具]
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【求助】

这个处理方法是用于HPLC测定的。
我在想,如果用于HPLC-MS测定的话,有磷酸盐会不会对质谱有损坏?我查到磷酸盐好像对柱子不好,容易赌赛柱子,那对质谱有影响吗?还是只要流动相中不存在磷酸盐就不要紧?
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无怨无悔[使用道具]
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【回复】

质谱的特异性更强,也许不需要这么复杂的前处理。当然,如果你用这个方法,最后的盐最好脱去,再上质谱。
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hcy517[使用道具]
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【回复】

磷酸盐缓冲液又经过二氯甲烷萃取,旋蒸后再定容,最后进样的已经没磷酸盐了
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daomei[使用道具]
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【回复】

20ml怎么旋蒸?
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【回复】

有50ml的旋蒸瓶的
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