小中大核酸样品的A260/A280值一般在1.7~1.9是比较合适,偏离这个值可能是由于蛋白含量偏高(A260/A280值大于2.0)、DNA样品中有RNA污染(比值小于1.7)、RNA中有机物如氯仿等污染(比值小于1.7)造成。值得注意的是:当样品中的脂肪含量较高,而使用的抽提方法又没有特别注意这一点时,比值也会偏低。DEPC水有影响,但不是根本性的问题。RNA的质量及浓度以在胶上鉴定为使用前的最终标准,以rRNA条带尖锐(sharp)且28S的亮度是18S的亮度的2倍以上为好。另外,不同组织、不同的RNA提取方法所得RNA跑胶时rRNA的条带数可能并不仅仅是28S和18S这2条,可能还有较大的条带,但与DNA的污染又明显不同,它们与点样孔的距离较远。一般来说,这样的RNA样品可能质量更好。
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谢谢!
我做了跑胶,出来了三条带,28S条带的亮度大约是18S条带的两倍,tRNA条带也出来了。各条带也都比较sharp的感觉。这样是不是就可以说明我提取的RNA没有大问题?