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28号令里,8号资料分了四部分,但是,好像也没明确说非要分出四部分来吧。
----------------------这个最好按照他们的思路来,否则看资料不方便,我们当时就放的位置不对,他们说我们没有,我们说有,他们就不耐烦。
至于建库,可不可以选出单克隆之后,直接就建原始库,然后建主库和工作库。建好之后,再对各个库检定,这样的话,稳定性考察,就考察工作库就行了,如果工作库没问题,那主库就更没问题了吧!
------------------单克隆评估过后,考虑建原始库,研究阶段会有很多单克隆,需要评估每个克隆的情况的。
------------------检定各个库都要做,关于稳定性,保存稳定性每个库都要跟踪,制定方案的,关于传代稳定性,在评估每个克隆的时候就要评估,后面的工作库肯定要评估的。
至于代次,微生物大部分还是passage number,动物细胞generation number。2010药典也说过,二倍体细胞龄以细胞群体倍增(population doubling)计算,传代细胞系则以稀释倍数进行传代,每传一次算一代。
-----------------------这个出处及依据在哪里,细胞的用generation的多,但是搞不清楚为什么微生物用Passage来标示。
如果每传一次算一代,那生产的时候,最终到了发酵罐,连续补料培养一个星期,这算是多少代呢?好像在摇瓶里根本就没办法模拟吧!
----------------------这个就是要摇瓶中模拟倍增数而已,必定是模拟倍增数,不能说非要做到罐子那么高密度。
如果按照倍增数量算的话,大肠杆菌或者酵母,最终的浓度都很高,按湿重计算的,而且发酵后期湿重不怎么增加了,甚至会下降,那这个传代次数怎么算?
-------------------------就是OD简单换算过来是多少倍增数(2的N次方),不是特别科学,也没别的办法,和细胞换算generation一样。
而且,如果在摇瓶里,按照每转一次算一代,那要不要加抗生素呢,生产上发酵罐里肯定不能加?
-------------------------不加抗生素的,或者种子活化加抗生素,后面模拟发酵罐的时候加。