小中大我以前做过这个品种,将自己的感想做一下简单描述:
液相色谱仪:戴安U-3000型
(1)使用氨基柱,紫外低波长检测。
优点:样品不用衍生就可以用来做含量;也可以用来做有关物质,虽说峰高到不了1000以上,600左右还是可以到的。
缺点:(a)样品浓度过高,2mg/ml以上很正常,我们做过5mg/ml的,重复性较差,做有关物质还将就,做含量绝对不可以的。(b)系统不稳定且管路容易堵塞。(c)在做有关物质时,会出现一个富马酸的峰,且峰面积比较大,不同厂家的门冬氨酸造成富马酸的峰面积差异较大,影响有关物质的真实检测。
(2)使用C18柱紫外检测器检测,样品衍生后测定含量。
优点:测定过程比较稳定,重复性还算比较好。
缺点:(a)衍生剂对各种氨基酸的衍生程度不一样,不能真实反映原样品中各氨基酸的真实组成,结果不可靠。(b)只能用来做含量,不能做有关物质,因为样品衍生后系统会出很多杂峰。(c)样品量较小,衍生过程繁琐,重复性较差,同一个人一直做,效果还不错。
该方法由于存在缺点(a),在2010年药典征求意见稿时出现在第七批,但是未收载在2010年药典的主要原因。
(3)使用示差折光检测器测定。
优点:样品不用衍生。
缺点:检测器灵敏度太低,不能真实反映样品的组成,同时富马酸会有干扰。
(4)使用离子色谱仪测定(本人未使用过,听药典会老师讲的,效果很好)。
优点:样品不用衍生,灵敏度高,结果准确。
缺点:成本太高。
你可以根据实际情况,选择合适的方法进行检测,祝楼主好运!