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标题:【求助】合成多肽免疫动物，多肽难溶，欲加DMSO等溶解...

summerxx[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 8s5g 于 2016-4-11 22:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我在公司就是做多肽KLH耦联的，其实耦联好的多肽溶解不掉是很正常的， 你用双蒸水溶解后的液体直接免疫动物，其实效价会很好的， 因为机体对固体颗粒的免疫效果比液体的更好。相反，你用DMSO溶解的时候，会破坏KLH的空间构象， 相 ...

请问那个公司？
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8s5g[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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11_hjx[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第一，建议多肽合成偶联KLH后就不要再重新冻干了，可以直接用，因为再复溶就会碰到你遇到的问题；
第二，即使溶解得不是很完全关系也不大，可能效果更好；
第三，DMSO没有影响；
第四，预测跟实际使用情况会有很大不同，意义不大。
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发表于 2016-4-11 22:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
根据多肽链就可以知道是疏水还是亲水，氨基酸都有特性的
每个氨基酸虽说都有氨基和羧基
但是其支链上海有其它基团
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发表于 2016-4-11 22:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

至少，DMSO对炎症反应（主要是白细胞的迁移过程）是有显著抑制作用的，尽管文献都这么使用DMSO来溶解某些试剂。按照文献使用的剂量和腹腔注射途径，我做了许多对照，才得出这个结论的。所以，一定要谨慎。
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发表于 2016-4-11 22:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
根据多肽链就可以知道是疏水还是亲水，氨基酸都有特性的
每个氨基酸虽说都有氨基和羧基
但是其支链上海有其它基团

================================================

实际意义不大，这跟成盐性质、冻干的物理性质等等相关。
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发表于 2016-4-11 22:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

学习了，但我有个问题，想请教下各位高手，用什么免疫方法，效价比较高呢？
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toy[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最近也在看相关东西，分享一下
下列方法有助于您选择合适的溶剂：
(1)判定多肽的电荷特定，设定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH为-1；碱性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2为+1,其它氨基酸的电荷为0。计算出将电荷数。
(2)如果净电荷数 >0，多肽为碱性，用水溶解：如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸(10%以上)；如果多肽还不能溶解，加入少量TFA(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。
(3)如果净电荷数<0，多肽为酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。
(4)如果净电荷数=0，多肽为中性，一般需要用有机溶剂如乙腈，甲醇或异丙醇，DMSO等溶解。还有人建议需要尿素来溶解疏水性很大的多肽。
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