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标题:【求助】抗体杂质检测项中的HCP残留酶联免疫检测...

BUK[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 xyw5 于 2016-4-11 22:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

商业化的HCP kit检测的结果只能代表通用的那些HCP的含量和比例，但是每个项目都有其特异的HCP比例，且各个蛋白对HCP的检测干扰程度不一样，所以见了专属的HCP检测方法是非常必要的。我们公司申报的一个产品，就被CDE要求补 ...

对呀，自己开发特异性ELISA成本太高。有什么解决办法么
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发表于 2016-4-11 22:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 BUK 于 2016-4-11 22:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

对呀，自己开发特异性ELISA成本太高。有什么解决办法么

成本高也没办法啊，毕竟咱做的是药啊，何况这点成本跟做药比起来已经算是很少很少啦。只能做，不然符合不了CDE的要求，啥都白费了，您说呢？
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发表于 2016-4-11 22:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 xyw5 于 2016-4-11 22:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

成本高也没办法啊，毕竟咱做的是药啊，何况这点成本跟做药比起来已经算是很少很少啦。只能做，不然符合不了CDE的要求，啥都白费了，您说呢？

我的意思，你们选择免疫动物，多抗做ELISA，还是用其他方法
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发表于 2016-4-11 22:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个我具体也不是很清楚，我是做纯化的，但大概思路应该差不多吧，就是用空载体表达无蛋白上清，进行全HCP的提取，然后注射入小鼠体内，接着提取多抗吧
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发表于 2016-4-11 22:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
但是，我琢磨了下，免疫小鼠，抗血清量太少了。除非是做单克隆抗体，做单抗又不适用于宿主蛋白检测。
所以，应该是免疫大型动物。
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发表于 2016-4-11 22:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 BUK 于 2016-4-11 22:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
但是，我琢磨了下，免疫小鼠，抗血清量太少了。除非是做单克隆抗体，做单抗又不适用于宿主蛋白检测。
所以，应该是免疫大型动物。

如果自己免疫制备HCP抗体，其中捕获抗体（Picture antibody）和检测抗体都一样要免疫动物吗？
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发表于 2016-4-11 22:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我理解，捕获抗体为宿主蛋白免疫动物获得的多抗。
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发表于 2016-4-11 22:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果自己免疫制备HCP抗体，其中捕获抗体（Picture antibody）和检测抗体都一样要免疫动物吗？

======================================

捕获的抗体需要，待检测的抗体就不需要啦
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雪花子[使用道具]
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发表于 2016-4-11 22:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 BUK 于 2016-4-11 22:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
但是，我琢磨了下，免疫小鼠，抗血清量太少了。除非是做单克隆抗体，做单抗又不适用于宿主蛋白检测。
所以，应该是免疫大型动物。

这个具体不是很清楚，但是我觉得小型的也够用啦，毕竟检测都是ng级别的啊，提取一批多抗怎么也得mg级别的吧
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发表于 2016-4-11 22:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
都是高手，学习了。我最近也在做Cygnus F550 CHO HCP ELISA kit的方法学验证，听这么一说感觉好复杂。特异的HCP检测方法开发的话需要半年吧，半年时间有点长呀。
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