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标题:【求助】液-液萃取,固相萃取和沉淀蛋白

yuanyuan[使用道具]
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【求助】液-液萃取,固相萃取和沉淀蛋白

小弟看了一些关于回收率的帖子,对于生物样品分析回收率(包括:液-液萃取,固相萃取和沉淀蛋白。)的要求一般是大于75%且稳定,但不知道这些规定源自那里,是药典还是国外的规定?希望大家能帮忙提供规定的出处。
另外想和大家讨论一下回收率为什么一定要大于75%,在灵敏度满足条件的情况下,回收率稳定就已经可以进行准确的定量分析了,为什么还要规定具体数据呢?
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今生如此[使用道具]
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【回复】

我的意见是这样的:关于回收率的问题有些同志确实比较模糊
回收率是作为建立方法的考察的重要指标,分为相对回收率和绝对回收率
相对回收率:也就是通常所说的准确度,计算方法是将加药样品经过处理后测定的响应值代入该样品的标准曲线,计算相应浓度值(A),然后除以样品中药物的加入浓度值。相对回收率主要考察标准曲线及建立的方法的准确度。
绝对回收率:也称为提取回收率,计算方法是加药样品经过处理后测定的响应值除以溶于流动相中的同浓度标准品的测定响应值。
大家觉得有道理吗?
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danzi[使用道具]
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3
 

【回复】

是没有具体规定吗?为什么没有人知道呢?
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今生如此[使用道具]
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【回复】

现行的标准应该没有明确规定回收率的高低 50%以上应该是约定俗成的 你可以看许多药物体内样品分析的著作 都是要求50%以上的 因为回收率过低也会影响检测灵敏度 但从原理上讲  只要稳定应该是可以的 据有战友介绍 国外提取回收率较低仍然作为分析方法的也有见的
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jishiben[使用道具]
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【回复】

在最新的国家新药研究技术指导原则《化学药物临床前药代动力学研究技术指导原则》中有
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jishiben[使用道具]
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【回复】

谢谢y9940520和铸剑,我没有《化学药物临床前药代动力学研究技术指导原则》,我尽量想办法看看。再次感谢!
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【回复】

再次感谢y9940520
我看了原则,指示规定各个浓度回收率一致且能重现,并没有数据规定。
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mimima[使用道具]
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【回复】

我想这位朋友还没搞清回收率的定义和目的,回收率又叫准确度,指你的测定值离真实值的程度。实验是有误差的,回收率不可能等于100%,一般高于100%(较少)和低于100%(较多),一般测定要求回收率在95%-105%,假如你的回收率为80%,说明你的测定值为真实值的80%,所以回收率越接近100%越好,结果越准确。但是考虑生物样品含量低,制备过程复杂,损失较大,所以一般规定回收率大于75%即可。另一方面就是因为生物样品损失太多,回收率过低,测定不准确,所以常常用内标法,内标物质与测定物质性质接近,即使两者在制备过程都有损失,但起比值是恒定的。回收率也容易达到100%,说白了其实制备过程都有损失,一般加样回收可以说是绝对回收率,而内标法为相对回收率,在生物样品准确度一般较高。
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n111[使用道具]
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【回复】

楼上的也作生物样品分析?
我想说的是提取回收率,不是相对回收率。
提取回收率=样品提取后的响应值/样品提取前的响应值
相对回收率=实际测得值/加入值
其中加入值是不用测定的,而样品提取前的响应值是实际测定的到的。
生物样品如果不用内标法测定是不能准确定量的,而且一定要用标准曲线。
请楼上的指教。
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哈密瓜[使用道具]
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【回复】

我的意见是这样的:关于回收率的问题有些同志确实比较模糊
回收率是作为建立方法的考察的重要指标,分为相对回收率和绝对回收率
相对回收率:也就是通常所说的准确度,计算方法是将加药样品经过处理后测定的响应值代入该样品的标准曲线,计算相应浓度值(A),然后除以样品中药物的加入浓度值。相对回收率主要考察标准曲线及建立的方法的准确度。
绝对回收率:也称为提取回收率,计算方法是加药样品经过处理后测定的响应值除以溶于流动相中的同浓度标准品的测定响应值。
大家觉得有道理吗?
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