小中大本人现做一化学药品,在进行HPLC分析出现一个问题,由于本品极性比较特殊,在流动相中加入少量有机溶剂(2%~3%甲醇或乙腈),产品出峰就很快,与溶剂峰不能分离,但在使用纯水做流动相时,出峰时间可以达到8分钟左右,而且峰型对称,柱效也不错,现在就想问下大家,我在用外标测该产品含量时,流动相是否可以只使用纯水呢?还是一定要配合少量有机相呢?当然,对于该产品的有关物质,不能只用纯水做流动相了,在有关物质测定中,我使用了梯度测定,前期保持纯水洗脱,后面逐步增加有机相比例,以检测极性小的有关物质,这样做对吗?
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你的情形最好不要用普通C18柱,尤其是不要用键合量高的反相色谱柱。可选用改性键合相的色谱柱。如Agilent的Zorbax SB-aqur, Waters的Atilatis aqur柱等。或内嵌入酰胺基的C16柱等。这类色谱柱与常规反相C18柱相比,选择性会发生改变,提高了纯水作流动相的耐用性。