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标题:【求助】蛋白质变性离心后大家一般都还要液液萃取吗

双子座[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白质变性离心后大家一般都还要液液萃取吗

在做药代动力学时，我们都要把血浆样品进行前处理，在蛋白质变性离心后大家一般都还要液液萃取吗？什么样的情况要用萃取？萃取是不是会更加损失血浆里的样品？
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兔子[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

血浆去蛋白离心后制得的上清液一般是要求萃取的。样品在离心过程中，虽然被测组分得到了纯化，但因微量的组分分布在较大体积的提取溶剂中，提取液往往还不能直接供分析用。一些分析方法如gc和HPLC等都受到进样量的限制，若将提取液直接注入仪器，被测组分量可能达不到检测灵敏度要求，因此，常需要萃取浓缩后进样。
萃取过程中可能会有部分样品损失，在方法建立过程中，应该考察回收率是否符合实验要求。
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发表于 2016-4-28 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

如果要液液萃取的话 不必要进行蛋白沉淀
一般也不推荐蛋白沉淀后直接进样 这样对柱子的承受力是个考验
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冰激凌[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

那一般是采取液液萃取吗
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yuanyuan[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

液液萃取是必须的
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 小中大

【回复】

考虑用乙酸乙酯萃取试试
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发表于 2016-4-28 13:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

呵呵，萃取是否要看你得样品得性质啊，不能盲目得一概而论啊
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jishiben[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

样品的什么性质呀？是看药物的蛋白结合率吗和提取回收率吗？能不能讲得详细一点，谢谢
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发表于 2016-4-28 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

血浆样品处理方法很多，有直接的沉淀蛋白，液液萃取，固相萃取等。可以单独使用也可以结合起来使用。
沉淀蛋白之后上清可以直接进样，也可以再液液萃取，这样根据待测物的性质和检测的要求的。
液液萃取肯定会有损失的。
固相萃取好，但成本高。
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青青草[使用道具]
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发表于 2016-4-28 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

萃取一般就是根据化合物的极性（脂溶性大还是水溶性大）选择萃取剂
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