[求助]使用液相的定量阀进样，一般进样体积有规定吗？

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标题:[求助]使用液相的定量阀进样，一般进样体积有规定吗？

ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2011-11-8 12:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

[求助]使用液相的定量阀进样，一般进样体积有规定吗？

如题:
使用液相的定量阀进样，一般进样体积有规定吗？
比如20ul的定量阀，一般进多少合适？
我们在进行生物样品分析，样品量很少，据岛津工程师说需要至少50ul的进样量。
不知各位有何经验？

@STAR@[使用道具]
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发表于 2011-11-8 12:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

按工程师说的做就是了，肯定没有问题的
我们做化药，一般是在定量阀满了以后流出1～2滴样品就可以了，如果是第一次则一般3～4滴。
对于生物样品分析，当然是能省就省了

101010[使用道具]
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发表于 2011-11-8 12:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

岛津工程师的说法是理想的状态,比如你是20微升的进样阀,需要进50甚至100微升,将其内部的原有流动相完全冲出,保证内部只剩下你的样品,这样你进样的时候才能够达到最佳仪器精密度.但是一般我们没有必要完全按照他们的要求这么做,我通常就进10微升,只要你的手法熟练,也能达到好的精密度.

ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2011-11-8 14:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

原理我是明白的，但是定量阀定量，我就想：如果20ul定量阀，我进样21-25ul，是不是能准确进样20ul？
我个人做过6年试验了，一直这样做，包括我呆过的几个实验室。我想知道这样到底科学不？

ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2011-11-8 14:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

#问号#[使用道具]
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发表于 2011-11-8 14:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对于定量环的问题，我是这样理解的：进样量小于定量环体积一半时，进样量和响应值是线性的；当进样量大于定量环体积3倍时，响应值是恒定的。（呵呵，我的表达能力不高。不知道说清楚没有）
对于20ul定量环，当你进样量小于10ul时，可以说你的进样量是准确的，你进了8ul样品，那么进入柱子的就是8ul样品，也就是说你的进样量是线性的。
当你进样量大于10ul时，你所注入的量并不等于进入柱子的量，因为在进样前，流动相就在不停的冲洗定量环，这时进样就存在一个稀释的问题，也就是说你在用你的样品溶液稀释定量环里面的流动相，这时，进样量并不等于进入柱子的样品的量。这时不存在线性。
当你继续增加进样量，（其实也是在不断稀释定量环里面的流动相），直到进样量大于三倍定量环体积时，这时由于你进样量远大于定量环体积，定量环里面才算时真正完全充满了样品。所以，这时你的进入柱子的量才等于定量环的体积。而且不会因为你继续增加进样量而改变。（还是不知道说清楚了没有）
这些都是些经验的数据（起码我没有做过），但是我做过一个小实验，20ul定量环，同一稳定样品，两次都进12.5ul，结果峰面积不等。但是进样量为1ul、2ul、4ul、8ul时，进样量和峰面积是线性的。
回到楼主的问题上来，如果你对进样水平自信，可以直接进小于10ul的样品；如果不放心，或者数据不理想，可以把进样量提高到3倍定量环体积以上。

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发表于 2011-11-8 14:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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发表于 2011-11-8 14:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一般进50-60微升为好.因你每次进样的浓度不一定一样,多进一些可以把上次残留的样品冲出去,使结果更可信.
当然,如果你每次进样后都用流动相过渡一下,就更应该进样多一点,使样品浓度不致被稀释.

00无名指00[使用道具]
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