[求助]复方氨基酸分析

生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]复方氨基酸分析

18 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]复方氨基酸分析

笨鸟321[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75369
精华 0
积分 188
帖子 115
信誉分 100
可用分 1321
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态离线

发表于 2011-11-11 17:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

[求助]复方氨基酸分析

请问；各位同仁，你们在做复方氨基酸注射液时（20种左右），是采用的那个公司的分析方法，那个方法相对成本较低，且实用。

8964357[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 76997
精华 0
积分 273
帖子 266
信誉分 100
可用分 2118
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态离线

发表于 2011-11-11 17:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Waters的ACCQ.TAG法

刘白白[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75237
精华 0
积分 157
帖子 74
信誉分 100
可用分 1091
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态离线

发表于 2011-11-11 17:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我建议采用戴安的AAA－Direct氨基酸分析系统，无须衍生化，近20种一起分析。
进样体积: 25µL
标准: NIST=2.5µmol/mL in 0.1 M HCl 溶液
稀释标准(用去离子水): 20nmol/mL
色谱柱: AminoPac PA10 分离柱与保护柱(2mm)
柱温: 30℃
系统操作反压: < 3,000 psi
淋洗液:
E1: 去离子水
E2: 250mM NaOH
E3: 1M 醋酸钠
淋洗液流速: 0.25mL/min
ED50操作参数: AAA Au 工作电极;pH参比电极;电位波型见表1.
梯度淋洗: 见表2.

色谱峰1- 精氨酸(Arginine); 2- 赖氨酸(Lysine); 3-丙氨酸(Alanine);4-苏氨酸(Threonine);5- 甘氨酸(Glycine);6-缬氨酸(Valine);7- 丝氨酸(serine); 8- 脯氨酸(Proline); 9- 异亮氨酸(Isoleucine);10- 亮氨酸(Leucine);11- 蛋氨酸(Methionine);12-组氨酸(Histidine);13- 苯基丙氨酸(Phenylalanine);14- 谷氨酸(Glutamate);15- 天冬氨酸(Asparate);16- 胱氨酸(Cystine); 17- 酪氨酸(Tyrosine)
表2. 梯度淋洗程序
时间(分)  %E1  %E2  %E3  曲线  Comments
Init  80  20  0  5  装样
0.0  80  20  0  5  进样
2.0  80  20  0  5
8.0  68  32  0  8
11.0  66  34  0  8
18.0  40  20  40  8
21.0  44  16  40  5
23.0  14  16  70  8
42.0  14  16  70  8
42.1  20  80  0  5
44.1  20  80  0  5
44.2  76  24  0  5
60.0  80  20  0  5
75.0  80  20  0  5  结束

刘白白[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75237
精华 0
积分 157
帖子 74
信誉分 100
可用分 1091
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态离线

发表于 2011-11-11 17:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

表1.波型
时间(秒)  电位(V)vs pH  积分
0.000  +0.13
0.040  +0.13
0.050  +0.33
0.210  +0.33  Begin
0.220  +0.60
0.460 +0.60
0.470  +0.33
0.560  +0.33  End
0.570  -1.67
0.580  -1.67
0.590  +0.93
0.600  +0.13

附件

2011-11-11 17:39

48793910.jpg (29.05 KB)

987789[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75248
精华 0
积分 479
帖子 598
信誉分 100
可用分 3870
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态离线

发表于 2011-11-11 17:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Waters的ACCQ.TAG法
运行一针,仅要45分钟!
双泵梯度

笨鸟321[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75369
精华 0
积分 188
帖子 115
信誉分 100
可用分 1321
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态离线

发表于 2011-11-11 17:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢,各位给我的指导,但是waters的成本很贵的,且很费色谱柱的,还有没有其他较好的衍生方法,安捷伦的方法,如何,有那位大师用过吗

笨鸟321[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75369
精华 0
积分 188
帖子 115
信誉分 100
可用分 1321
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态离线

发表于 2011-11-11 17:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

快求助,我在做冻干样品费休水分测定时,因为样品含的有结晶水,且特容易吸潮,最重要的是它不溶于无水甲醇,所以每次测定水分经常超出限度,但费休样品溶液的色泽看起很深了,(显紫红)请问这样合理吗,有啥办法呢,药典上不是也有样品不溶于无水甲醇,但不还是用费休法测量吗?

newway[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76575
精华 0
积分 505
帖子 689
信誉分 100
可用分 4253
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-7
状态离线

发表于 2011-11-11 17:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

PITC,比Waters的ACCQ.TAG法要容易做,且成本低

minran_1980[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75816
精华 1
积分 339
帖子 293
信誉分 102
可用分 2344
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态离线

发表于 2011-11-11 17:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我公司用的是卫生部九八年颁发的一个标准，混合氨基酸含量（除色氨酸和乙酰半胱）采用氨基酸分析仪测定，色氨酸采用紫外测吸收度法，乙酰半胱采用HPLC

云端ing[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 73234
精华 1
积分 194
帖子 103
信誉分 102
可用分 1251
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态离线

发表于 2011-11-11 17:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢,各位给我的指导,但是waters的成本很贵的,且很费色谱柱的,还有没有其他较好的衍生方法,安捷伦的方法,如何,有那位大师用过吗

==============================================================================================================

最近刚好在做氨基酸的测定，手头上没有资料，只好凭记忆告诉你。
用的就是安捷伦的柱前衍生，是用OPA试剂和硼酸溶液柱前衍生，然后进样分析。
流动相是A:以乙酸钠为主的水相
流动相B：乙酸钠和甲醇，乙腈混合，以有机相为主。
梯度洗脱，25分钟走完。

柱子是安捷伦公司特定的做氨基酸分析的柱，2.1mm粒径。
你可以联系安捷伦公司，他们会有一个氨基酸分析包的，包括试剂和柱子还有特定的分析软件，（如果不是特殊分析，软件可以不要，试剂也可以制剂配制，）他们也有成熟的方法可以给。

18 1/2 1 2 ››