生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]如何确定某个色谱峰为单一峰?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]如何确定某个色谱峰为单一峰?

october7[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77254
精华 0
积分 448
帖子 616
信誉分 100
可用分 3856
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
1
 

[求助]如何确定某个色谱峰为单一峰?

[求助]如何确定某个色谱峰为单一峰?


进行HPLC分析时,怎样才能知道某一个色谱峰是否是单一峰呢?特别是分析中药成分的时候?标准品加入法、DAD、还有改变流动相的组成是否能说明呢?
顶部
药徒[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76214
精华 0
积分 183
帖子 105
信誉分 100
可用分 1266
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
2
 

做一个峰纯度不就知道了吗?
顶部
october7[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77254
精华 0
积分 448
帖子 616
信誉分 100
可用分 3856
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
3
 

如果两个化合物结构很接近,保留行为和UV吸收也一致,看纯度还可行吗?
顶部
00无名指00[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76070
精华 0
积分 493
帖子 666
信誉分 100
可用分 4151
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
4
 

回复 #3 october7 的帖子

既然这样不行,是不是可以做个结构确证什么的?
顶部
药徒[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76214
精华 0
积分 183
帖子 105
信誉分 100
可用分 1266
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
5
 

回复 #3 october7 的帖子

如果有已知的那两个化合物或标准品,分别进一下样,看看其峰位是否在同一时间来简单确认该样品是否为一个物质,行不行?
顶部
二子[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76464
精华 0
积分 208
帖子 155
信誉分 100
可用分 1531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
6
 
液相上有一句经典的话说得好 “出两个峰肯定不是一种物质,出一个峰不一定是一种物质”。
一般来说,至少要用两种以上方法验证,才能基本证实某种物质为单一组分。我们这里确定一个蛋白要用到电泳、凝胶色谱、反相色谱才基本确定其单一性。
就算抛开手性异构体不谈,你用一种色谱的方法也无法很确定的证明该峰物质的唯一性。
顶部
october7[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77254
精华 0
积分 448
帖子 616
信誉分 100
可用分 3856
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
7
 
嗯,如果是已知化合物的话,标准品加入法的确可以验证!可是中药中含有那么多复杂的成分,不可能有所有的标准品啊!
顶部
october7[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77254
精华 0
积分 448
帖子 616
信誉分 100
可用分 3856
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
8
 

回复 #6 二子 的帖子

那么我该如何具体的确定该色谱峰的唯一性呢?
顶部
ha111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72969
精华 0
积分 821
帖子 1239
信誉分 101
可用分 7048
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
9
 


QUOTE:
原帖由 二子 于 2011-11-15 12:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
液相上有一句经典的话说得好 “出两个峰肯定不是一种物质,出一个峰不一定是一种物质”。

我感觉问题并不完全是这样子的,有时候一个纯度很好的样品在不合适的条件下可能出现两个峰,不同的解离形式可能被分开,这种情形在方法学建立的时候我已经不止一次遇到了,呵呵。

不知道又没有谁有这样的经历
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
10
 
楼上说的很对,分析条件不适合的条件下,本来一个单一的峰会变成一个难看的峰,象是里面包着另外的物质一样,优化条件后就会好,看到单一峰,应该用DAD来查看光谱,是否有光谱性质不一样的现象来判断
顶部