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标题:[求助]请教:磷酸盐与亚磷酸盐检查----阴离子交换色谱法

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[求助]请教:磷酸盐与亚磷酸盐检查----阴离子交换色谱法

[求助]请教:磷酸盐与亚磷酸盐检查----阴离子交换色谱法



在下做磷酸盐与亚磷酸盐的检查,标准中使用waters IC PaK 柱,而我们用依利特 SAX 柱,其他检测条件相同,但就是没检出对照品峰。

刚开始时怀疑流动相、样品溶液等配错,但一一重新做了;由于样品浓度非常小,也曾怀疑灵敏度,但也都调了,再者配制一系列浓度,由低到高进样,还是没有检出。水是超纯水,现配的。目前怀疑是洗脱不出,不知各位有何高见,在阴离子交换色谱中,加入哪些试剂可以增加洗脱能力呢?在下目前还没想出解决办法,恳求各位战友能指点一二。

另不知这两种柱子在填料和性能上有和区别?
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曾今做过膦甲酸钠,亦是waters IC PaK柱,开始的时候不太明白具体的原理,也是发现没有峰出现,但是随着试验的进行发现出的是负峰,使输出信号为相反即解决。阴离子交换柱可使用的溶剂较少,基本就是水与邻苯二甲酸氢钾缓冲液,当时对这个很有兴趣,试了好多阴离子,发现此流动相,可分离各种常见阴离子。后来请教别人才明白具体原理,间接光度离子法,当时确实对理论一无所知。

磷酸盐与亚磷酸盐在290nm处基本无吸收,用的是邻苯二甲酸氢钾缓冲液作为流动相的目的是,邻苯二甲酸氢钾在290nm处有较强的吸收,利用其差异性使信号发生改变而出峰,但由于邻苯二甲酸氢钾的吸收较大,故上述阴离子应出现负吸收,需要调节仪器的正负极使出峰为正,即可,可适当调整流动相的盐浓度。
如果还不行建议换色谱柱,用邻苯二甲酸氢钾测定磷酸盐与亚磷酸盐是一种相当成熟的方法,此项目我做了几套,原料、大输液、小针。
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实验前也查阅了相关资料,已将信号线的正负反接,但就是不行。为了证实此原理的可行性,我还对流动相进行紫外扫描,确定在290nm处有较大吸收。也曾把波长调到278nm处,但也还是不行。

另,还想请教一下,你们能买到磷酸二氢钠和亚磷酸氢二钠这两种对照品吗?在哪里有卖?
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huifeng0516[使用道具]
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如你所述,有可能是柱子的原因,当时waters ic pak柱很贵,考虑到价格原因,曾经咨询过某”专家“不建议购买国产的,因此仍然买了此柱。

磷酸二氢钠是国内购买的试剂,进行了精制。
亚磷酸氢二钠是通过百灵威从国外购买的试剂,考虑到价格没有买99.99%含量的,买的是98.0%含量的,500g,价格299,99.99%的是2000+。
一般无机杂质的限度检测对照品要求并不严格。

离子的解离受pH值的影响较大,不知道你的pH值多少,我用的是0.5mM的邻苯二甲酸氢钾,2.5mM的硝酸作为流动相。
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1、您用waters IC PaK柱进溶剂空白(水)时是否也有两个小峰(信号线反接情况)?再者您用于贮存流动相的瓶子也用玻璃瓶吗?我点担心用玻璃瓶会影响,但我还是没有用塑料瓶。如果下次买了waters IC PaK柱,还得考虑是否用塑料瓶。

l2、您曾做过膦甲酸钠,想必对阴离子交换柱的使用和维护方面也掌握不少吧?能否传授些经验?我们跑样结束后是用超纯水冲洗柱子的,不知道您是用什么冲洗?另,您是否也用0.1%的叠氮化钠保纯该柱子吗?

刚接触此类柱子,虽查阅了不少文献,但有很多地方还是不太明白,还望日后多多指教!先谢谢了!
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对照品与您所说的一样,但不知如何精制磷酸二氢钠?

您说“我用的是0.5mM的邻苯二甲酸氢钾,2.5mM的硝酸作为流动相”这个我不太明白,能细说吗?我是按照标准上所说(取邻苯二甲酸氢钾0.204g,加水溶解,加1mol/L硝酸5ml,加水至2000ml)我的流动相最后测pH值为2.6左右。

考虑要改变些流动相了,但不知道该如何改
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waters ic pak ( 50×4.6mm)柱是不是一万多一跟啊
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1.柱子10,000.00
2.流动相就是取邻苯二甲酸氢钾0.204g,加水溶解,加1mol/L硝酸5ml,加水至2000ml
3.我一致用的是塑料瓶、塑料烧杯,说明书特别说了用塑料瓶。
4.阴离子交换柱(Waters IC Pak 50*4.6mm),使用要注意一下几点:
避免出现的:
4.1.不能用甲醇和四氢呋喃.
4.2.试验用水要超纯水,电阻率18兆欧母。
4.3.冲柱子用纯水即可,保存该柱子应该是保存在葡萄糖酸和硼酸中。
为达到更好的效果需要做的
4.4.为避免离子的影响,尽可能避免玻璃的使用,应该用塑料仪器代替,至少塑料的烧杯,盛流动相的塑料瓶子。
4.5.不能有2价以上的阳离子。
4.6.进样量尽可能不超过100PPM。
其他注意事项跟一般柱子一样。
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您说保存该柱子应该是保存在葡萄糖酸和硼酸中

硼酸是固体,葡萄糖酸没见过,请问这两种试剂使用时浓度又是多少呢?
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以前我接触过一个间接紫外的条件,用C18柱子(SAX太贵了烧不起),0.1M的四丁基氢氧化铵,再用饱和邻苯二甲酸氢钾调pH到7。当时也是尝试了很多柱子,有些柱子就是不出峰,有些出峰但很宽,另外,至少在C18柱上,一般在分析离子的后面会出一个系统峰的,如果这个系统峰都没出,基本上这个填料的就没戏。供参考。
另外有些检测器正负交换后还是不正常的,好像是负值会有限度。当时还是正常接线,然后在工作站中的检测器设置中设置了极性交换解决的。
条件不同,仅供参考。
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