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标题:[求助]胰岛素的含量测定（HPLC）

u234[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
“药典一般规定理论塔板数在2500以上”，你从药典中哪里看到的？ 其次，我建议你多看看药典，把药典中规定需要满足的条件满足了。其次，我对于你说的用长柱子来进行分析，得出的主峰出峰时间怎么那么短，感到惊讶。我曾经摸索条件时，用手头现有的长柱子试时，主峰保留时间太长，好像都有一个小时。你需要更换柱子了，你更换短柱子试试吧。这个药是很老的药了，中国药典说的都是很模糊的，美国药典上收载的该药，信息就比较全面，多看看美国药典，会对你有所帮助。
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u234[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有就是通过你的描述，我觉得你应该是在安捷伦液相上采用双泵进行低压梯度混合后进行的，倘若是这样做的，行吗？我没有试过，也不愿去试，担心盐析出堵塞管路。但通过看药典，说配制该流动相需保证温度在25度以上，以防析晶，据此，我认为是先把流动相按比例混匀好后再进行样品分析，而不是采用双泵进行混合。

我用的就是短柱子。
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发表于 2011-11-15 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有一点说错了：“但通过看药典，说配制该流动相需保证温度在25度以上，以防析晶，”------是保证温度在20度以上
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马大牙[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我明白了，那我换一根短柱试一下，谢咯

还有一个问题，你说把缓冲盐和乙腈混合好了与用两个泵混合，有什么区别吗？温度应该不会变啊，都是在同一个实验室，用同一台仪器做，还有就现在这个温度，应该不会有结晶析出来吧。我以前用岛津的仪器也是混合好了做，但总觉得用量筒不太准，也很麻烦，也不能控制柱温，所以就换两个泵的安捷伦了。

请教一下，购买短柱时（除了能适合大分子蛋白测定的色谱柱，适宜的PH值范围）还应注意什么问题啊？
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马大牙[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
药典上说的A21胰岛素是胰岛素放久了之后的杂质吗？你做出来过这样的两个峰（胰岛素峰和A21胰岛素峰）？
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u234[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

对于你说的第一个问题：首先我没有按你说的用双泵来进行流动相的配制，不好回答。你不妨试下两者的差异，如果没有差异，也没有析晶堵塞管路，那就按你说的那样做也无妨。去年冬天刚做该药的时候，记得好像还是有关物质检测时配制流动相时，就出现这析晶现象。

对于色谱柱购买这块：我的也就是普通的色谱柱。耐受低pH也就行了。

对于你的第二个问题：想更正下你的说法，A21脱氨基胰岛素不是杂质，请仔细看药典。对照品室温下至少放置24h后会有A21脱氨基胰岛素。我的是图谱中是有，请见我之前发的回帖。
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helloxtc[使用道具]
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发表于 2024-4-11 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

老师有跑过聚集体吗?用尺寸排阻色谱柱

请问尺寸排阻色谱分离胰岛素单体和聚集体时，它们的检测波长相同吗？我这个是依柯胰岛素，20版药典里没有，查到的专利没说检测波长
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