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标题:[求助]益母草的HPLC测定

水母[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]益母草的HPLC测定

[求助]益母草的HPLC测定


关于益母草中盐酸水苏碱的含量测定，文献中采用HPLC法的有十几篇。采用甲醇为溶剂，配制盐酸水苏碱，进行波长扫描，发现最大吸收波长为196nm或197nm。因为很多溶剂在210nm以下都有吸收，不知道用HPLC法测定可不可以。在196nm下，基线冲了2个多小时都冲不平，冲平之后，进样时基线又突然飘到－200或－10了（C18柱，甲醇－005mol/l磷酸二氢钾）。
想请问一下，有没有高人做过益母草水苏碱的HPLC测定，能测出来吗？有没有什么溶剂可以把吸收波长增大些的呢？
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发表于 2011-11-15 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

紫外检测器是检测不到的.没有流动相可选.
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2011-11-15 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 水母 的帖子

你可以查了一篇文献，供你参考－－HPLC法测定鲜益母草中盐酸水苏碱的含量
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发表于 2011-11-15 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用甲醇可能不行
换乙腈试试
或者将波长改到210试试
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发表于 2011-11-15 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这篇文献里用的是氨基柱，据其他文献报道，也是说氨基柱比C18好，但是我们试验室只有C18的。这篇文献里面盐酸水苏碱也是用甲醇溶的，吸光度是203nm，我们测的是196nm左右，在200～203的范围内，吸光度很小。
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 小中大

回复 #4 66+77 的帖子

在210nm没有吸收峰，而且吸光度很小，几乎是一条平的线，把波长改到210nm可能不行。乙腈倒是可以试试
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发表于 2011-11-15 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1，波长的选择：对于末端吸收的物质，只要其有较强吸收，为了避免干扰，尽量往后选择波长，这是文献为何选择203nm作为测定波长的原因；但也别选择210nm，因为你的物质在该波长没有吸收，选择210nm，无法检测；

2，因盐酸水苏碱极性较大，在C18柱上保留很小，无法保证测定结果，所以选择氨基柱；

3，乙腈在色谱吸收行为上往往比甲醇要小，且洗脱能力强于甲醇，所以选择乙腈。
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发表于 2011-11-15 15:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问使用氨基柱有什么需要注意的么，与C18相比较
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发表于 2011-11-15 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
常用的各种色谱柱使用方法及注意事项在园里有很多，自己搜搜
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5093948_0.html')
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发表于 2011-11-15 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这种情况下，最好还是选择其他的检测器。
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