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标题:[求助]梯度洗脱时主峰后端基线上漂严重怎么办?

youyou99[使用道具]
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[求助]梯度洗脱时主峰后端基线上漂严重怎么办?

[求助]梯度洗脱时主峰后端基线上漂严重怎么办?



检测一个片剂的有关物质。液相色谱条件为:

色谱条件与系统适用性试验 采用含量测定项下的色谱条件与系统适用性试验,应符合要求。以乙腈-水-醋酸(57:43:1)为流动相A,乙腈-水-醋酸(90:10:1)为流动相B,在30分钟内使流动相A的比例由100%到0,流动相B的比例由0到100%(调整流速使坎地沙坦酯出峰时间约为12分钟),分析时间从溶剂峰后算起约为坎地沙坦酯峰保留时间的2.5倍。
测定法 取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于坎地沙坦酯4mg),精密加入乙腈-水(3:2)溶液10ml,超声处理10分钟,过滤,取续滤液,作为供试品溶液。另精密称取坎地沙坦酯对照品约10mg,置50ml量瓶中,加乙腈适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置50ml量瓶中,加乙腈-水(3:2)溶液稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl,分别注入液相色谱仪,按外标法以峰面积分别计算各有关物质的量。

先后在两台不同的仪器(同是岛津的LC-20A系统,差不多同时买的),首先在A机上空白溶剂、对照溶液出峰都正常,但样品溶液在主峰后基线上漂比较严重;同样的流动相和色谱柱换到另一台B机上后样品溶液主峰后基线就不怎么漂了,很正常,中间还将A机的检测器替换到B系统上后出峰也很正常。

后来还是在A机上复检,先后通过用异丙醇冲洗系统,定量环清洗并超声处理,将B系统中的进样阀前后端的管路及混合器替换到A中以及关闭空调后情况依然如故,请高手救急。具体的色谱图如下:
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youyou99[使用道具]
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主要是由于A与B溶剂的紫外吸收差异所致

在反相体系中,B浓度在分离期间是增加的,有机溶剂的紫外吸收总是大于水,所以就。。。

另外,一般是通过那个所谓的“吸收匹配”来消除的

而且也要注意乙酸的纯度,以及配置一致性问题,还有就是样品配制也要注意下

另外,问题也要控制一下
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yapuyapu[使用道具]
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基线漂移应该还是系统不干净吧。小弟一点愚见。是否可以将整个系统不连柱子进行冲洗呢?
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排除了流动相,色谱柱,检测器,温度的差异了,仪器型号也是一样,那么,会不会是柱外效应呢?比如,连接的管线过长导致拖尾?
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gogo[使用道具]
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基线漂移应该还是系统不干净吧。小弟一点愚见。是否可以将整个系统不连柱子进行冲洗呢?

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已经不连柱子(二通取代柱子)的情况下用异丙醇冲洗过了
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gogo[使用道具]
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排除了流动相,色谱柱,检测器,温度的差异了,仪器型号也是一样,那么,会不会是柱外效应呢?比如,连接的管线过长导致拖尾?

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呵呵 连接的管线用出峰正常的那台机里的管线替换过还是老样子
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