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标题:[讨论帖]高效液相中内标的作用

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[讨论帖]高效液相中内标的作用

[讨论帖]高效液相中内标的作用



最近在做药代动力学的实验,要做内标。我发现我和老板对内标的认知有些分歧。我认为计算出内标与被测物的比例后,就能用内标来计算样品中被测物含量。所以,我在样品定容时才加入内标,以确保内标的准确。但老板认为内标只是用来监控样品提取回收率的(method extraction recovery)的指标,内标应该在一开始就加入样品中和样品一起进行提取。样品的加样回收率我已经做过了,还有必要用内标来控制每次提取的回收率吗?
上网查了一下,国内的文章大多数时按我的想法做的。但国外的文章,维基百科就和老板的想法一样。搞得我现在都弄不清做内标的目的到底是什么?
规求高手指点!!
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ha111[使用道具]
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我想不管是内标还是外标,都是进行对照用,也就是为了测定样品,如果你的内标最后加,我想是不合适的,起不到对照的作用了,何必内加呢,直接外标得了,你说是不是?个人观点
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我现在是内标外标都做。都不知道有没有这个必要。所以想弄清楚做内标的意义是什么?
是为了定量,还是做提取回收率
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wood533[使用道具]
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当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的待测组分溶液使用同一份内标物质溶液时,则配制内标物质溶液不必精密称(量)取   

采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。

需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。
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tuomu45[使用道具]
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药典上有写!

采用内标法,可以避免样品前处理及进样体积误差对测的影响!

所以,应该在提取前加入,你老板的方法应该是对,但是,目的不是为了回收率而是为了避免测定误差!

个人观点!供参考!
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我想不管是内标还是外标,都是进行对照用,也就是为了测定样品,如果你的内标最后加,我想是不合适的,起不到对照的作用了,何必内加呢,直接外标得了,你说是不是?个人观点

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药典上有写!

采用内标法,可以避免样品前处理及进样体积误差对测的影响!

所以,应该在提取前加入,你老板的方法应该是对,但是,目的不是为了回收率而是为了避免测定误差!

个人观点!供参考!

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我举反对意见!

我觉得内标应该后加。

既然都是起到对照的作用,那如果提前加内标进去,怎么保证内标在提取过程中的损失与样品一致呢?如果不一致怎么做对照呢?

既然目的是为了避免样品前处理的误差就应该后加入,提前加入怎么避免?

希望大家各抒己见,我很想知道答案。。。。
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wanglaoshi[使用道具]
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回复 #6 bananapeople 的帖子

所以内标物才需要和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质,损失也基本一致
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H2O[使用道具]
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药典上有写!

采用内标法,可以避免样品前处理及进样体积误差对测的影响!

所以,应该在提取前加入,你老板的方法应该是对,但是,目的不是为了回收率而是为了避免测定误差!

个人观点!供参考!

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我认为楼上说的很对
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qumm1985[使用道具]
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觉得这个问题应该不是很复杂啊

不管具体测定使用什么方法,都是为了测定结果的可靠性

那么如何来保证测定结果的可靠性呢

比如使用对照品,内标或外标

这样的道理其实跟空白的道理相类似吧

如果对照不跟样品进行同样的操作,用对照有何用?

同理对于空白的理解也是一样的

还有疑问?
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