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标题:[求助]检测限和定量限实在打不出来咋办？

wood533[使用道具]
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发表于 2011-11-24 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]检测限和定量限实在打不出来咋办？

[求助]检测限和定量限实在打不出来咋办？



最近挺郁闷在做一化药的方法学验证，定量限和检出限一直打不出来，柱子残留很大，用各种办法冲洗还是有，不知怎没解决，大家帮帮我吧，谢谢！
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木槿[使用道具]
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发表于 2011-11-24 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请把你的流动相，色谱柱等信息告诉大家吧

我知道你心里很着急，但是留在心里别人看不到啊
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wood533[使用道具]
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发表于 2011-11-24 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

流动相是：10Mmol/L醋酸铵：乙腈=50:50，流速1.0，检测波长220nm,柱子：艾杰尔C18，250*4.6，5微米粒径
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发表于 2011-11-24 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
给几个建议

1.最好是使用高性能的色谱柱，这样工作就相对好开展了

2.你使用的220nm波长，基线噪音本身就比较大，特别是对于灯能量低的情况下，更是如此，所以平衡时间要适当的延长了

3.流动相中所有的成分均要有一定的洁净度，否则在低波长下，噪音更大

4.保持恒定的温度

5.正确的稀释样品：很多人都想一步到位，其实那是非常的不科学，而且检测限与定量限并不是做一个结果就行了的

6.其他问题
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DDD[使用道具]
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发表于 2011-11-24 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主你好，我遇到过你这样的问题，主峰一直有残留，怎样洗都还会有，出来的线性低浓度的也会有影响，我也在奇怪，agilent1200和1260竟然也会有残留，岂不是自动进样器越来越不行了，只有一个办法，用这根柱子换别的流动相先做一下别的，然后上这个流动相后，不要先进高浓度的东西，直接进空白，然后先做LOQ和LOD，或者中间停2天，先不做试验

祝您好运，呵（agilent有扣除空白的功能，不过呢，不知道cde的人认不认的）
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发表于 2011-11-24 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主你好，我遇到过你这样的问题，主峰一直有残留，怎样洗都还会有，出来的线性低浓度的也会有影响，我也在奇怪，agilent1200和1260竟然也会有残留，岂不是自动进样器越来越不行了，只有一个办法，用这根柱子换别的流动相先做一下别的，然后上这个流动相后，不要先进高浓度的东西，直接进空白，然后先做LOQ和LOD，或者中间停2天，先不做试验

祝您好运，呵（agilent有扣除空白的功能，不过呢，不知道cde的人认不认的）

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这也算是做实验？
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发表于 2011-11-24 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主你好，我遇到过你这样的问题，主峰一直有残留，怎样洗都还会有，出来的线性低浓度的也会有影响，我也在奇怪，agilent1200和1260竟然也会有残留，岂不是自动进样器越来越不行了，只有一个办法，用这根柱子换别的流动相先做一下别的，然后上这个流动相后，不要先进高浓度的东西，直接进空白，然后先做LOQ和LOD，或者中间停2天，先不做试验

祝您好运，呵（agilent有扣除空白的功能，不过呢，不知道cde的人认不认的）

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有时这么做确实能解决问题，但前提是柱子的问题，如果是方法本身问题.....
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发表于 2011-11-24 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果方法没问题的，就是色谱柱性能的问题了
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发表于 2011-11-24 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种情况是色谱柱的可能性不大，因为你流动相是等度，所以如果是色谱柱残留一般不会集中在一个时间点出来，另外如果是色谱柱残留，那你用新柱了子从低浓度开始进样，残留不就解决了。

我觉得是进样那块的残留。我曾经遇到个这种情况（流动相是磷酸盐－乙腈－甲醇，Waters，荧光检测器），当时也浪费了很多时间，连续洗针不能很好解决这个问题，我当时是在确定大概的LOD和LOQ后，先用这台仪器做其他产品2-3个完整的序列（每个序列大概40针）下来，残留就解决了
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zhenxin[使用道具]
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 小中大

个人认为色谱柱、流动相等都是这个方法的一部分，应该在对方法就行研究，采取投机取巧的方法来解决问题毕竟是不合适的，方法研究透彻了，验证自然过关。
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