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标题:[讨论帖]大家谈谈使用离子对试剂的经验

tuuu2[使用道具]
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[讨论帖]大家谈谈使用离子对试剂的经验

[讨论帖]大家谈谈使用离子对试剂的经验


最近有个疑惑,就是离子对试剂的优劣对基线噪声的影响是否很大?

有经验的老师能否就您们使用离子对试剂的经验呢?

希望能够给初学者或是有疑问的色谱工作者一个借鉴,参考与学习的机会呢?谢谢大家

1、国内产的离子对试剂与国外产的离子对试剂质量对比,如何?

2、离子对试剂是否会影响基线噪声?

3、大家使用质量优异与劣质的离子对试剂配制流动相,都发生了哪些现象呢?是否会出现有的可以检测出杂质,有的检测不出呢?即是否会发生色谱选择性的变化呢?
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plaa[使用道具]
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昨天遇到了这样的问题,原来检测不出,换了试剂,峰位变了,多了一个杂质,正会出现有的可以检测出杂质,有的检测不出。正郁闷
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tuuu2[使用道具]
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通过两天来的调查与了解,得知加入离子对试剂的流动相的pH值非常的重要,会影响选择性!我们实验室检测同一种物质,相同条件下,不同的人配置的流动相的pH先后相差0.3~0.8,这样不同pH的流动相检样品主峰,有的分叉有的不分叉,但由于流动相pH值不同造成的多峰现象我还是不太了解原因?
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lagua123[使用道具]
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最近有个疑惑,就是离子对试剂的优劣对基线噪声的影响是否很大?

有经验的老师能否就您们使用离子对试剂的经验呢?

希望能够给初学者或是有疑问的色谱工作者一个借鉴,参考与学习的机会呢?谢谢大家

1、国内产的离子对试剂与国外产的离子对试剂质量对比,如何?

2、离子对试剂是否会影响基线噪声?

3、大家使用质量优异与劣质的离子对试剂配制流动相,都发生了哪些现象呢?是否会出现有的可以检测出杂质,有的检测不出呢?即是否会发生色谱选择性的变化呢?


关于离子对试剂在国外专门有人做过研究,有关离子对试剂在反相色谱中分离的机理,以及影响因素都有。

============================================================================================================

1.关于国产和国外的离子对试剂质量,我们做过比较,国产的质量只能说一般般,在普通条件下可以使用,但是如果在极端的条件下,会出现杂质峰。进口的不存在这个问题,而且离子对试剂是很费钱的,400多一小瓶没几次就用完了

2.这个看离子对在紫外区是否有吸收了,大部分情况下在紫外末端会有吸收的,就好比某些缓冲盐在低波长不能使用(乙酸盐缓冲液)

3.关键是如果做有关物质的话,你试剂不纯的话,走空白都会出现鬼峰,这样的话你去判定结果的时候会非常的麻烦,一般等度条件很少出现这种情况,最让人头疼的是在梯度条件下出现的鬼峰。

具体你可以参考以下的文章

Knox JH, Hartwick RA. Mechanism of ion-pair liquid chromatography of amines, neutrals, zwitterions and acids using anionic hetaerons[J]. Journal of Chromatography A, 1981,204: 3-21.

而离子对试剂在试剂操作中注意的因素有

第一离子对的浓度,这个一般情况下在满足要求的前提下,越低越好

第二 离子对的pH,这个是进行分离的最关键的因素,而只能在缓冲液中测定pH,千万不要混合以后测定,普通的pH是不能在有机相中测定pH的。

第三,如果使用离子对试剂,一定注意平衡时间,正常的话在60-90分钟才能达到彻底的平衡,还有在实验结束以后要冲洗超过2个小时。

第四,我的经验,用离子对的实验所用的柱子一定要和其他的非离子对的分开,不然你的柱子会不可逆的损伤!
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楼上
的回答已经比较全面了

其实说白了,你不用管它离子对不离子对,就当它一般试剂对待就是,纯度高的自然好些,工艺、纯度、级别等因素都会有所影响,看有无影响最重要,如果国产的进样没任何影响,就不必非得买进口的了。
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tuuu2[使用道具]
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关于离子对试剂在国外专门有人做过研究,有关离子对试剂在反相色谱中分离的机理,以及影响因素都有。

1.关于国产和国外的离子对试剂质量,我们做过比较,国产的质量只能说一般般,在普通条件下可以使用,但是如果在极端的条件下,会出现杂质峰。进口的不存在这个问题,而且离子对试剂是很费钱的,400多一小瓶没几次就用完了

2.这个看离子对在紫外区是否有吸收了,大部分情况下在紫外末端会有吸收的,就好比某些缓冲盐在低波长不能使用(乙酸盐缓冲液)

3.关键是如果做有关物质的话,你试剂不纯的话,走空白都会出现鬼峰,这样的话你去判定结果的时候会非常的麻烦,一般等度条件很少出现这种情况,最让人头疼的是在梯度条件下出现的鬼峰。

具体你可以参考以下的文章

Knox JH, Hartwick RA. Mechanism of ion-pair liquid chromatography of amines, neutrals, zwitterions and acids using anionic hetaerons[J]. Journal of Chromatography A, 1981,204: 3-21.

而离子对试剂在试剂操作中注意的因素有

第一离子对的浓度,这个一般情况下在满足要求的前提下,越低越好

第二 离子对的pH,这个是进行分离的最关键的因素,而只能在缓冲液中测定pH,千万不要混合以后测定,普通的pH是不能在有机相中测定pH的。

第三,如果使用离子对试剂,一定注意平衡时间,正常的话在60-90分钟才能达到彻底的平衡,还有在实验结束以后要冲洗超过2个小时。

第四,我的经验,用离子对的实验所用的柱子一定要和其他的非离子对的分开,不然你的柱子会不可逆的损伤!

================================================================================================

您好老师!感谢您的回复:)

您说的第三点“平衡时间”是冲柱子的平衡时间?还是配制含有离子对试剂的缓冲盐溶液搅拌均匀后的平衡时间?问题幼稚,但我觉得有必要问明白。
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木槿[使用道具]
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您好老师!感谢您的回复:)

您说的第三点“平衡时间”是冲柱子的平衡时间?还是配制含有离子对试剂的缓冲盐溶液搅拌均匀后的平衡时间?问题幼稚,但我觉得有必要问明白。

==============

冲柱子的平衡时间
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kuaizige[使用道具]
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1。加有离子对试剂的流动相很难平衡,对柱子伤害也很大!

2。PH的高低影响很明显。

3。和进口离子对试剂相比,国内的的离子对试剂分离效果不好!

个人拙见
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tuuu2[使用道具]
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1。加有离子对试剂的流动相很难平衡,对柱子伤害也很大!

2。PH的高低影响很明显。

3。和进口离子对试剂相比,国内的的离子对试剂分离效果不好!

个人拙见

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高人,几句话点醒梦中人!能够就第二条与第三条展开来讲,譬如说遇到的实验现象呢?

如第二条中pH的高低会有什么影响?第三条,是否您了解到检测某些项目时,国产的离子对试剂是分不开某些杂质的?
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星星点灯[使用道具]
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回复 #9 tuuu2 的帖子

我们在做六类的某一项目用到戊烷磺酸钠,流动相要求的pH为2.10,结果由于仪器问题,pH没达到要求。峰前延很严重,拖尾因子只有0.85。后来对仪器重新校正,峰行就变得很好了。开始的时候用的国产的戊烷磺酸钠,拖尾且不理想,改用日本进口的,无论分离度还是拖尾,都非常不错。

不知道这样说,楼主明白没?呵呵
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