05 NMT和激光共聚焦技术的比较

什么是激光共聚焦

激光扫描共聚焦荧光显微镜（laser scanning confocal microscopy, LSCM）是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。                    

主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等。其不仅可以得到非常清晰的荧光图像，进行多重荧光标记的定位和定量分析，还具有图像三维重建、荧光共振能量转移谱测定，甚至膜电位测定等功能，成为生命科学研究的重要技术手段。

激光共聚焦的局限

随着激光共聚焦技术应用范围的扩大，其在研究中的局限性也逐渐突显。
激光共聚焦技术主要采集的是生物样品内部的离子分子信息，这些离子分子信息的改变既可能源于样品内部离子/分子源的变化，也可能源于样品内外的离子/分子交换。这两种离子/分子变化过程是由完全不同的生命机制引发的。
这要求研究者必须通过其它实验结果，才能得出相对准确的结论。若单纯用激光共聚焦数据作为检测或诊断标准，往往面临较大的假阳性风险。

NMT对比激光共聚焦

• 共同点 :实时
  

                动态
                数据可视化
                测定游离的离子  

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                                          数据可视化

• 差异
  

      （1）激光共聚焦技术                  

        使用染料和激光光源              

        需要标记      

        荧光易发生淬灭      

        测量时间短        

        半活体（有损伤）      

       检测内部的离子浓度变化     

       测定种类较少，依赖于染料        

       测量材料不能太大，以细胞为主      

       只能同时测定一种离子      

     （2） 非损伤微测技术   

        使用电极或者传感器
        无需标记
        电极或者传感器稳定
        测量时间可短，可长
        近似活体或者完全活体（测定无损伤）
        检测跨膜的离子流速以及外部的离子浓度  

        测定种类多，可测Na+，K+，NO3-，O2等

        测量材料不限，从细胞到整体都可以测量
        可以同时测定两种离子
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NMT可测样品种类繁多

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NMT可以同时测定两种离子

• 结合
  
  

          将激光共聚焦技术与非损伤微测技术(NMT)的结合，可以克服单纯用激光共聚 焦数据作为检测或诊断标准面临较大的假阳性风险，实现全面获得被测样品内外的离子/分子流动信息。实现内外兼测。

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