细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]DC细胞最长可以培养多久？与单核细胞的形态区别？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]DC细胞最长可以培养多久？与单核细胞的形态区别？

windy+++[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74130
精华 0
积分 490
帖子 720
信誉分 100
可用分 4343
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-6
状态 离线
1

发表于 2011-12-16 10:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]DC细胞最长可以培养多久？与单核细胞的形态区别？

[求助]DC细胞最长可以培养多久？与单核细胞的形态区别？


DC细胞体外最长可以培养多久？时间长了是不是也贴壁呢？我用人外周血培养这个细胞，但是1周后，觉得悬浮细胞数量太少，也就放置了也换液。等到第3周的时候，发觉细胞全部贴壁了。数量好象略有增加。想请这里有经验的朋友帮忙解释1下。多谢！
顶部
911[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73229
精华 1
积分 523
帖子 682
信誉分 102
可用分 4276
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
2

发表于 2011-12-16 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问你的细胞是否是从单核细胞用细胞因子诱导生成的DC细胞啊，我想将单核细胞诱导成巨噬细胞，你有比较好的方法吗？谢谢！
顶部
qqq111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73201
精华 0
积分 830
帖子 1238
信誉分 101
可用分 7086
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
3

发表于 2011-12-16 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般由外周血单核细胞诱导扩增的DC在第9或10天就应该收了,你养了三周就不好说了.
顶部
笑弯了腰[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78476
精华 0
积分 232
帖子 203
信誉分 100
可用分 1756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-29
状态 离线
4

发表于 2011-12-16 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我在养树突状细胞时，看了些文献，其中提到GM-CSF可使外周血单核细胞转变为巨噬细胞
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
5

发表于 2011-12-16 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

其实由单核细胞诱导分化巨噬细胞很容易，我在培养DC的过程中经常发现降低GM－CSF的浓度。或使用低浓度的IL4都可以诱导单核分化为巨噬，但分化为DC就不很容易。
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
6

发表于 2011-12-16 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
另外奉劝一句，DC的培养出来绝对有明显突起的，光镜就可见，贴壁的梭形细胞是巨噬细胞，建议先摸一个较好的细胞因子浓度，否者很浪费。细胞因子的质量很关键。R&D公司的细胞因子是最好的，不过很贵，但是细胞养出来就是很好。我可以传张我的照片给你们看一下。
顶部
蒲公英[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70433
精华 0
积分 232
帖子 203
信誉分 100
可用分 1761
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-10
状态 离线
7

发表于 2011-12-16 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

第三週太久了....通常在第7天就已經是immature DCs 了
在用LPS刺激4天左右成熟


查看积分策略说明
附件
2011-12-16 10:58
75060955.snap.jpg (23.68 KB)
 
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
8

发表于 2011-12-16 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上的照片聚焦有点欠佳，再调一下焦，换黑白底照就好了，你可以不用相差，那样效果可能会好些，可以试一下。大致细胞的轮廓试那样，不过好像突起少了些，我养的也有这样的，我觉得这种细胞质量不高，毛刺越多细胞越好。
顶部
小螺号[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74175
精华 0
积分 291
帖子 321
信誉分 100
可用分 2356
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
9

发表于 2011-12-16 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们都是第七天收获。。。。。。
顶部
flower-201[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74055
精华 0
积分 443
帖子 605
信誉分 100
可用分 3785
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
10

发表于 2011-12-16 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
降低IL-4的浓度就能使单核细胞向巨噬细胞分化，IL-4的一个主要作用就是抑制单核细胞分化成巨噬细胞。

单核细胞分化过程中是处于贴壁状态的，但是加入刺激因子如LPS，TNF-α后DC成熟就会逐渐浮起，成为半贴壁状态。
顶部