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标题:[求助]请问关于TUNEL的结果分析

yhz1973[使用道具]
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发表于 2011-12-16 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]请问关于TUNEL的结果分析

[求助]请问关于TUNEL的结果分析


想看一下我做的这个TUNEL试验的结果，我的问题是如何判定哪些是发生了的调亡的细胞核？是否只包括那些发亮，形状饱满的细胞核？那么有一些稍小一点，形状不甚规则，有些残破，或者亮度不那么强的是否也算呢？另外我还注意到有一些虽然绿色荧光很强，但是DAPI染色却很弱，甚至很难看到；另外有一些DAPI很强，呈现聚缩状态，或者有核碎片出现的，（如果在Hoechst染色这些应该算作是调亡核吧？）但是并没有TUNEL染色。这究竟是怎么回事？
下面三组共六张图，每组分别是TUNEL及TUNEL和DAPI 的Merge


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 小中大
merge 1


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 小中大
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 小中大

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 小中大

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 小中大

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发表于 2011-12-16 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

注意到正常重合是否应该是呈现蓝绿色，何时有的地方只有绿色，没有蓝色，或者蓝色很弱这种核究竟算不算调亡？或者只是杂质？
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发表于 2011-12-16 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该可以使用免费软件CASP进行荧光强度的分析,将总的细胞的荧光强度的量值进行统计分析,得出结果.
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发表于 2011-12-16 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种检测方法是凋亡与坏死的细胞都可以检测出来的. 它的原理毕竟是基于DNA的断裂.所以注意并非所有的阳性细胞都是凋亡所致,我建议用Annix-V同步检测凋亡.
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发表于 2011-12-16 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的TUNEL 试剂盒promega（G3250），说明书没有说可用于冰冻切片，大家有没有用冰冻切片做过呢？
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