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标题:[求助]请教十字mark的画法

greenbee[使用道具]
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1
 

[求助]请教十字mark的画法

[求助]请教十字mark的画法


请教高手:流式图画十字mark时的依据是:
该管的同型对照?还是细胞分群?
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乌贼老弟[使用道具]
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参考贴:cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/5334864')

同型对照!
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greenbee[使用道具]
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谢谢!
我上传几张图,请老师们帮我分析分析。
同型对照:


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Q1:此张图的同型对照为上图,但是从图上可以很明显看到细胞的分群的分界和按照同型对照划分的不一致。请教老师该图如何分析较好?


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这张也是。


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greenbee[使用道具]
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这张图是以PE和APC为坐标,PE和APC是没有补偿可调节的,而从理论上来说,没有双阳性的细胞,请教此图上的那点双阳细胞是否是调节获取条件不当造成的?应该如何改正?
我那个实验一批做很多管,使用同型对照调节电压,使用确切的单阳细胞群调节补偿,其他管都没有什么问题。


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下面两张图来自两个正常未经过处理的动物外周血样本,获取条件一致,同批其他测试管差别不明显,但是这两张图FL-2 PE的荧光强度差异太大,请问除了个体差异外,有其他可能的原因吗?


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greenbee[使用道具]
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第2张


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9
 
另外,我觉得流式的结果如何分析非常重要,我开始学习流式几个月,在样本置备和上机方面基本没有什么问题了,可是直到现在对结果的分析上还是有很多的疑惑,尤其是在确定阴性和阳性细胞群的问题上,我在园子里问过相关的问题,可是疑惑还是没有解决。
最近关于十字marker的划分特意咨询了两位专家,一位是生产流式细胞仪的某大公司的资深技术顾问,他的建议是按照同型对照来划分阴阳性细胞群;另一位是接触流式利用流式做研究20多年的免疫学教授,他的建议是根据细胞分群来划分。就在左右为难的时候,同事建议查权威文献,结果查到2005年的nature上一篇文章是按群分析的,一篇1995年的science是按同型对照来的,这下更头痛了。
不知道哪位朋友有更好的建议?

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为什么有时候要用同型对照的机理,这是根据生物学和光电科学的原理产生的,不是经验得来的!按细胞团来分是人工分的,同时也是不科学的,因为荧光干扰会使一团细胞中的一部分进入另一团,因此不科学!!

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乌贼老弟[使用道具]
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结果查到2005年的nature上一篇文章是按群分析的,一篇1995年的science是按同型对照来的。。。。。

能将nature上的文章传上来吗?这种说法似乎有失偏颇!

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