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很简单,这样的情况是流式检测老师的错误:
1.他按照常规操作将没染色的细胞信号作为空白对照调阴性置信区,然后与你的染色空白管比对的结果,但在DCFH检测方法中,仅需将你染色的空白管(没处理,染色)作为阴性对照调节荧光信号,并将该管的荧光信号主峰置于直方图中间位置,这样不管你的实验时抑制还是促进均能反应出来。注:不染色的空白细胞可不用,即使要用也仅作为FSC和SSC电压调节用,不作为荧光信号调节。
2.DCFH 是ROS 的俘获剂,空白对照细胞内正常成在ROS,一经染色同样具有较高的荧光细胞,故不能用不染色的空白细胞作为阴性对照,否则将出现你这样的结果,荧光主峰右偏,不便你实验结果分析,特别是促进实验。
祝实验顺利!