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标题:[求助]淋巴细胞传代培养问题！

缘yuan[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]淋巴细胞传代培养问题！

[求助]淋巴细胞传代培养问题！


本人从ATCC花了7000多元买了一株淋巴细胞系，培养后见培养基里面有很多小黑点，而且在小幅度的运动；培养的淋巴细胞形态不规则，而且部分细胞聚集成团，但培养基不浑浊。有没有战友碰到过这种情况，是不是细胞污染？该如何进行下一步处理，感激不尽！谢谢！
具体培养细胞图片如下：


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2011-12-31 08:38
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笑弯了腰[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一家之言啊：
仅仅是血清里的碎片而已，一般质量不好的血清或者一瓶血清的最后一百毫升都会有这种东西的。（如果LZ是400倍放大的话，那么我几乎100%确定我的结论）
不影响细胞培养
另外，淋巴细胞系一般都是成团生长的。

问一下，这是什么细胞？什么来源的什么细胞？ 怎么貌似还会贴壁？NK细胞NKT细胞？
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guagua[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是细胞破碎后的细胞碎片
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guagua[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 笑弯了腰 的帖子

拿来的血清你们没有过滤吗？？过滤了一般不会有这种碎片吧
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发表于 2011-12-31 08:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑线虫？支原体？
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lixi559[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能性：
1、细菌污染，在高倍显微镜下看看。
2、细胞随片
3、其他微生物污染，衣原体等

建议：
1、换新的培养液
2、收集细胞，低速离心（350RPM左右），2-3分钟，去除上清，用PBS重悬，再次低速离心，去除上清，新培养液悬浮
3、检查培养箱设置，温度和水等
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笑弯了腰[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 guagua 的帖子

拿来的血清你们没有过滤吗？？过滤了一般不会有这种碎片吧

=======================================

养免疫细胞的血清一般都不过滤，防止内毒素污染
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qqq111[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

外周血淋巴细胞 培养3d 用什么细胞因子？我老养不活，也不知道什么原因，3d后连个细胞的影子都没啦
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笑弯了腰[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #8 qqq111 的帖子

原代的么？IL-2啊
"连个细胞的影子都没啦" 死了也会有碎片啊，我的经验是淋巴细胞死后基本不裂解啊
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qqq111[使用道具]
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发表于 2011-12-31 08:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #9 笑弯了腰 的帖子

刚分离出来培养几天就有些会裂解，变成颗粒状
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