细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]如何配置不同葡萄糖浓度培养基？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 11  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]如何配置不同葡萄糖浓度培养基？

四福晋[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78669
精华 0
积分 197
帖子 133
信誉分 100
可用分 1431
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-1
状态 离线
1

发表于 2012-1-7 08:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]如何配置不同葡萄糖浓度培养基？

[求助]如何配置不同葡萄糖浓度培养基？


小的初学，想做血管内皮细胞方面的实验，目前使用的培养基是普通高糖DMEM，打算用不同葡萄糖浓度处理细胞，但是不知道如何配置...问题如下：

1、直接用高糖DMEM配置，还是用无糖的DMEM配置？有的文献中说高糖DMEM中含葡萄糖浓度为25mmol/L（葡萄糖含量4500mg/L），不知道如何算出25mmol/L的？

2、使用的是葡萄糖粉末？液体？还是什么？具体怎样配置的？

非常感谢！
顶部
dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
2

发表于 2012-1-7 08:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

摩尔=mg/180(分子量)

应该用正糖的吧，也就是1000mg/l的来配吧
顶部
乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
3

发表于 2012-1-7 08:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
内皮培养用低糖就足够了，培养用低糖DMEM(葡萄糖浓度为5.5mmol/l)。
另外把葡萄糖用低糖DMEM配成浓度比较高的母液，实验时按照所需要的终浓度，计算出需要加入的母液的量，体积不够的用低糖DMEM补足。

计算终浓度时把低糖DMEM里的葡萄糖也要计算进去，单位用mmol/l。

DMEM里的葡萄糖是人家制备的时候加的，包装上都会注明加了多少。
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
4

发表于 2012-1-7 08:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 dongdongqiang 的帖子

~正糖是啥东东哦？1000mg/l来配...不是太明白哦？
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
5

发表于 2012-1-7 08:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
内皮培养用低糖就足够了，培养用低糖DMEM(葡萄糖浓度为5.5mmol/l)。
另外把葡萄糖用低糖DMEM配成浓度比较高的母液，实验时按照所需要的终浓度，计算出需要加入的母液的量，体积不够的用低糖DMEM补足。

计算终浓度时把低糖DMEM里的葡萄糖也要计算进去，单位用mmol/l。

DMEM里的葡萄糖是人家制备的时候加的，包装上都会注明加了多少。

=============================================================================================================

我在购买细胞的时候，专门问了他们，说是用高糖的DMEM来养的，所以也就只能这么养了。他们培养基上只说了D-葡萄糖 4500mg/l，换算成mmol/l是多少哦？还有请问一下，您是用什么葡萄糖配的哦？
顶部
乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
6

发表于 2012-1-7 08:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不一定要用高糖的，我，还有很多战友们都是用低糖的，你可以用低糖的养一下看看状态。
而且关键是你要看不同浓度葡萄糖对内皮的作用，培养基里的糖就不要太高，除非你要的就是那种影响很大的模型。

4500mg/l就是25mmol/l。

找个试剂公司，买sigma或者其他公司原装的或者进口分装的葡萄糖就行。
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
7

发表于 2012-1-7 08:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #6 乌贼老弟 的帖子

嗯，今天问了试剂公司，他们说如果想要不同浓度的糖，他们可以帮忙配的，而且如果只是糖升高基本不用加多少钱~shuangrenmu，我还想一下，如果现在细胞已经用高糖培养了一小段时间了，换低糖的培养会有问题吗？而且对最后实验的结果会有影响吗？还有就是需要怎样过渡一下嘛？嘻嘻~非常感谢~
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
8

发表于 2012-1-7 08:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养的是EA.HY926细胞，我看也有战友用高糖培养，然后高糖环境时用50mmol/L的处理的哦，不知道有没有人知道行不行呢？
顶部
乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
9

发表于 2012-1-7 08:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你用低糖的传代看看生长情况怎样，如果能正常生长，就拿来做实验。

可行不可行，试试看就知道了。
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
10

发表于 2012-1-7 08:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #9 乌贼老弟 的帖子

呵呵~好~我查了一些影响因子高的文章，大家都是直接用低糖培养，然后用高糖预处理的，我觉得应该不会有大问题~非常感谢！
顶部
 11  1/2 12››