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标题:[分享帖]凋亡形态学

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发表于 2012-1-7 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[分享帖]凋亡形态学

[分享帖]凋亡形态学


陆续将给出个人收集的凋亡图片，并尽可能给出详尽的解释，因为不是专业搞凋亡，解释错误的地方欢迎pm指正。另欢迎补充有价值图片！一起共建，自己学也帮别人学。因为不是基本知识传授，所以概念性的东西就不提了，以凋亡的形态学变化为重点，包括显微镜和电镜，可能还有DNA方面的。


这幅图很精辟的解释了凋亡的内涵，所以放在第一张，各位慢慢体会

[ 本帖最后由 一叶 于 2012-1-7 17:00 编辑 ]


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 小中大
碧云天凋亡试剂盒hoechst33258染色，他们认为细胞发生凋亡时，染色质会固缩。 所以Hoechst染色时，细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

正常细胞核


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 小中大
刺激后有致密浓染的凋亡细胞


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发表于 2012-1-7 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
The image below shows human lymphoma cells treated with the chemotherapy agent camptothecin. The cells that are undergoing apoptosis appear yellow and show the characteristic membrane blebbing (bubble formation)seen in cells dying via apoptosis.

这幅图是网上的，我想找到他的染色方法，可惜始终没找到。我给出来主要是给各位看荧光显微镜下凋亡小体的样子，这个问题曾经困惑我很久，群友们有兴趣可以看看。


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发表于 2012-1-7 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
全文：
cuturl('http://www.cancerquest.org/printfriendly.cfm?printsec=15')
里面的几个动画还是有点意思，不过，凋亡的这个，总觉得有点不对，我不多说，各位看看！
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发表于 2012-1-7 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想这副图片的细胞染色法应该是AO-EB染色法吧。因为我在做这种方法，觉得很简单，但效果明显，图片漂亮，只是假阳性稍高。
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发表于 2012-1-7 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Promega公司的DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统能标记片断化的DNA，而这种片段化的DNA被视为是细胞凋亡的典型生化特征之一。DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统是一种在组织切片与培养细胞中标记凋亡细胞核的理想方法，与此同时，还可以做形态学上的评估。本文中，将展示此种方法在细胞凋亡的原位细胞, 动物模型及多种病理学组织切片中的应用。
原文：
cuturl('http://www.promega.com.cn/notes/emgzf/2003-4/5.htm')

抗Fas单克隆抗体（50ng/ml;克隆CH-11,Oncor）诱导的Jurkat细胞的细胞凋亡。DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统标记Fas单克隆抗体处理过的细胞核（16小时），而未处理过的则未被染色(右下角插图)。


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 小中大
借这篇英文还是复习一下凋亡的起源和凋亡细胞的形态学特征，加深一下印象吧：
cuturl('http://www.eirxtherapeutics.com/kc1086_site/eirx_pages/apoptosis1.htm')
Apoptosis is of Greek origin meaning "falling off". The term is used in an analogy to the apparent suicide of leaves resulting in the very visible colour changes associated with the Autumn/Fall and that eventually leads to the leaves falling from the trees. Similiarly, cells go through a preordained sequence of events resulting in death and removal from the body.

Apoptosis is a regimented sequence of events, with each act being executed in a timed fashion. Its orderliness is often referred to as the "dance of death". Microscopic examination of the cell reveals that there are events occurring both externally and internally that can be listed as follows:

Externally:

Shrinkage or loss of volume of the cell
Blebbing on the surface of the cell
Externalisation of a phospholipids termed phosphatidylserine
Internally:

Condensation of cytoplasm
Breakdown in mitochondria integrity with the subsequent release of apoptosis inducing factors such as cytochrome c
Activation of caspases
Degradation of chromosomal DNA into 180-bp internuclosomal fragments
Degradation of a large number of proteins (>100) thought to be important in the cell survival and metabolism

这应该是个免疫组化的片子吧，我没做过
Two human tumour cells, one normal (left) and the second (right) undergoing apoptosis following exposure to cytotoxic drugs


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发表于 2012-1-7 15:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼上.DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统实验流程，链接失效就亏了，把流程也留下来吧


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发表于 2012-1-7 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

What happens during apoptosis?
To kill itself, a cell first makes a deadly chemical cocktail. It then separates itself from its neighbours, and unleashes the poisons. These include a substance that chews up the DNA in the cell nucleus, and a 'glue' that binds the inside of the cell together. Within a few hours, the cell shrinks, breaks up and is engulfed by other cells.

A cancer cell (mauve) undergoing apoptosis.
Dr Andrejs Liepins/Science Photo Library


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