细胞世界

嗯，我是根据1999年lutz的方法，当然做了一些改进，培养DC很多人用的是高浓度的细胞，高浓度的因子，但是这样产量不高，我每一次分离一只小鼠的骨髓，大约可以得到10E+7个细胞，分成10盘，每盘10ml培养基，用低浓度的细胞因子，这样可以大大提高产量，每次能培养得到1*10E+7个DC左右，流式细胞术检测：细胞纯度应该大于90%，这个方法还是很好用的。

[ 本帖最后由 一叶 于 2012-1-14 14:38 编辑 ]

Thanks for sharing.
I have 2 Questions:
1. The bones seemed broken instead of sperated from the joint. Does it easierto get
contaminated or not?
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分离的时候注意严格无菌操作，骨头取出来，去除了骨上组织之后，在75%无水酒精里面浸泡2分钟，然后用1640清洗4次，再冲洗骨髓，不容易被污染


2. How many cell will you get genreally from one mouse?
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培养之前细胞数大约是10的7次方左右(杂的细胞），培养之后1*10的7次方，文献报道的是10的8次方，我做得最好的时候也没有那么多，保守一点
Thanks a lot!

谢谢分享，我也有点疑问：
2、请问楼主隔天换液是怎么换，上清全扔到，补加fresh medium吗？3、还有后面的半量换液，更换的Medium里细胞还要么？
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离心后弃上清，保留细胞，加新鲜培养基，补充细胞因子，终浓度200U/ml