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标题:[求助]35%、45%percoll分离液的配置

tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]35%、45%percoll分离液的配置


这类的帖子很多，但是大家说的好像都有不同，而且看了一下也不是很明白，在这里请各位大侠帮助一下！
35%、45%percoll分离液的配置？
谢谢了！！
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
35% 和45%的实际浓度是多少阿？
9：1佩出来的原液，是100%还是90%的？
困惑！
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是100%~~~~~~~~~~~~~~~
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
非常谢谢！
我仔细学习了一下percoll的配置方法。
自己配了一下，不知道对不对，请大侠们看一下。
（我采用的是一步法，不知道这个方法和两步法有什么不同，那篇文章中好像没讲）
要配置35%的percoll液12ml，查了一下资料，密度是1.043g/ml，（不知道这个对不对）
1. 加入1.2ml 1.5M的NaCL
2.percoll液（未稀释的）3.4ml
3.蒸馏水7.4ml
不知道这个对不对？

另外想问一下：
那个1.5M的NaCL是不是就是8.5％ NaCl？
为什么有的是8.5％ NaCl有的说是9.0％ NaCl？
这个1.5M的NaCL是不是可以直接换成1.5M的PBS,而2和3不变？

期待高手帮我解决一下！！！
急用！
非常感谢了！
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我还有个问题：
用1.5M的NaCL和1.5M的PBS，有什么不同？

由于整个实验室现在在做实验的老师、师兄师姐都没配过percoll
没办法
希望哪位能帮帮忙
谢谢
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气泡[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
先配90%的percoll，方法：5ml灭菌的10*Dhanks加50ml percoll原液，即成90%percoll。你说的那几个浓度根据需要用1*dhanks按不同比例稀释即可。我是做原代心肌细胞的，我是这样配制的，不知道你做什么细胞，是否适合，仅供参考把
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盼盼[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我配的Percoll液的步奏是:
1.先配90%的Percoll液:按PBSercoll=1:9的比例配90%Percoll,此步的PBS为10x的.
2.35%的percoll分离液:总体积9ml,90%的Percoll液3.5ml,1xpbs 5.4ml,1%双抗0.1ml
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伊莎贝拉[使用道具]
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发表于 2012-1-14 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第一步 先用10*的PBS液1份加percoll分离液9份
第二步 1*PBS液65ml加35ml第一步配好的液体(35%的percoll液)
我是这么配的,效果还可以
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