液相色谱

各位大侠救救我吧，之前求助的问题（走空白梯度出现杂峰）依然没有解决。
原以为是柱子污染，我换根柱子，保护住一走空白梯度在（乙腈：水）高浓度区还是出现杂峰。今天把系统用水-异丙醇-水冲洗了一遍，杂峰依然出现。
现在已经排除了流动相，柱子，保护住，仪器污染的可能；进样阀也洗了好多次了，而且走空白时我也没有动手动进样阀，而是在桌面点击的。
还有什么原因呢，查了一下资料有的说混合器的问题，请问混合器自己如何修理啊



[ 本帖最后由 miracle 于 2012-1-17 15:28 编辑 ]

感觉好像不是柱子问题。1.有可能样品在乙腈/水中溶解度小，所以会出现这种现象。建议楼主把流动相换成甲醇/水系统。2.样品像是有弱酸性，建议楼主将流动相调成酸性试试。祝好运！

个人感觉还是进样阀的问题（如果进样阀没有接错的话），需要完全拆开，超声里面的定子。进样模式中（如果有的话，如waters仪器），建议不要选満环进样或溢出进样，选择部分进样模式。进样时，设置洗针。
另外，有可能是进样针或是针座污染，agilent的仪器可以把针座单独拆下来超声，不知道你用的仪器是否可以。
建议楼主把你的条件详细写出来，包括仪器品牌、型号、流动相组成、梯度、流速、色谱柱品牌、规格、检测器设置等等，以便大家从中找出问题所在。

楼主用的是LC-solution系统吧，建议跑的时候设置一下压力线，右键可选择设置，把进样过程中压力的变化显示出来。

另外问一句，每次跑出来杂峰图谱都不一样吗？系统压力和以前相比，怎样？

254nm背景吸收不强，应该和溶剂无关。混合器好像在泵的右侧，拆这个东西我不熟，所以不多说，但这个问题不多见。但建议你拆一下检测池，把凸镜卸下来清洗一下。检测池在检测器里，前方打开，拔线，旋开塑料螺丝，拆开线路即可卸下检测池，然后用螺丝刀旋开那壁上的内壁螺丝，即可取出透镜，左右两边透镜不同，还有垫片，不要弄错了。（一边平面镜一边凸透镜，垫片一样），15%稀硝酸（或异丙醇）超声清洗，再用纯水清洗安装回去即可。

如果管路有强保留物质存在，异丙醇清洗效果也不会太明显的，得用到三氯甲烷，但这个比较麻烦，反相使用前后都需要异丙醇过渡，而且使用不当容易破坏色谱柱，就不推荐了。

本人遇到情况和你一样,就是流动相的原因,说更明白一点就是乙腈的原因,换品牌(不要相信进口的国外品牌都适合你的系统),不要用滤膜过滤(包括砂芯).

你只要在样品检测时扣除空白就可以了，不要总纠结在空白上！

岛津LC-20AT，spd-20a,
时间 乙腈   水
0      30     70
7      60     40
10     95     5
13     95     5
13.01 30     70
23      stop
只要柱子型号一样，杂峰就一样
晚上又试了一下，不接柱子走梯度还行，接短柱子和长柱子的不一样

[local]1[/local]
不接柱子

[local]2[/local]
接短柱子

[local]3[/local]
接长柱子

岛津LC-20AT，spd-20a,
时间 乙腈   水
0      30     70
7      60     40
10     95     5
13     95     5
13.01 30     70
23      stop
只要柱子型号一样，杂峰就一样
晚上又试了一下，不接柱子走梯度还行，接短柱子和长柱子的不一样


不接柱子


接短柱子


接长柱子

问题可能在你的管路或是流动相受到污染，比如邻苯二甲酸酯类物质的污染？只是猜测，试试换一家公司的乙腈，或者从兄弟单位借点乙腈和水试试
good luck

从谱图来看，应该是柱子的问题，更换其他品牌的柱子试试