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研究新基因功能的同志请留意该方法。
表达EGFP的质粒和目的基因共转染用于检测目的基因对细胞周期的影响
在基因功能研究过程中，常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达（transient expression），以流式细胞仪检测细胞周期的变化，观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同，转基因的效率也不同，往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因，没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测，是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染；在共转染时，加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒的量，以保证表达GFP基因的细胞能够表达目的基因。由于普通的GFP是表达于细胞胞浆内，在细胞周期检测过程中进行乙醇固定时，GFP会从胞内泄漏，造成无法区分转基因细胞和阴性细胞。解决的方法是在GFP蛋白的末端加入膜定位信号，使GFP定位表达于细胞膜或胞内膜上，这样可以大大减少处理过程中GFP的泄漏、丢失，从而可以有效地 区分转基因和未转基因细胞。我采用以下几种表达绿色荧光蛋白的载体：pBB14、pCMVEGFPspectrin、pEGFPN-1对这种方法进行了评价。
该文献将近期发表。
