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标题:[求助]PC12细胞培养疑问：细胞呈梭型还是圆形？

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-2-2 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]PC12细胞培养疑问：细胞呈梭型还是圆形？




最近要用PC-12做药物筛选，并且最后需要种96孔板，查了ATCC有两种pc12细胞，一种是贴壁一种是微贴壁？这两种细胞在生理方面有什么区别？上海细胞库有三种细胞是未分化，低分化，高分化的细胞，这细胞之间的区别是什么，这是怎么回事？询问了曾经养过这个细胞的师姐，说是pc12只有两种一种是长成梭型的贴壁细胞，还有一种是长成圆的微贴壁细胞，不知道我说的分化和未分化是什么意思，我还没开始养这种细胞，以前也没怎么养过细胞，只是最近要测化合物活性了，需要这种细胞，打算买，但看了很多资料和帖子后，有太多疑惑，不知道买哪一种？特别是ATCC卖得贴壁性的细胞传代时需要用殊工具scrape.没见过有人用过这东西，还有有的要用胶原或聚氨基酸包被板子，不知道怎么回事，这是必须的吗？
希望养过PC12的前辈们不吝指教！本人将感激不尽！谢谢！
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发表于 2012-2-2 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

分化的PC-12细胞使用NGF诱导的，贴壁，长梭形的，很好养。你测化合物的活性，最好确保NGF对实验没有干扰。一般买的25cm2的培养瓶都用多聚赖氨酸包被过了，传代后一般2-3个小时就可以贴壁了。至于用什么样的，看看文献，寻找共同点就可以了。下面是我养的PC-12细胞。


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发表于 2012-2-2 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

忘说了，我的是ATCC高分化的PC-12细胞。
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发表于 2012-2-2 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是我的未分化细胞，


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发表于 2012-2-2 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 Ao7 于 2012-2-2 12:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

分化的PC-12细胞使用NGF诱导的，贴壁，长梭形的，很好养。你测化合物的活性，最好确保NGF对实验没有干扰。一般买的25cm2的培养瓶都用多聚赖氨酸包被过了，传代后一般2-3个小时就可以贴壁了。至于用什么样的，看看文献，寻找共同点 ...


文献两种类型的细胞有人都用过，这种分化的细胞以及ATCC上卖得贴壁的高分化的细胞都是用NGF诱导的吗？
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发表于 2012-2-2 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 abc816 于 2012-2-2 12:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这是我的未分化细胞，  

这种未分化的是不是不好养，不容易贴壁？特别是种在96孔板里，需要洗涤加药的时候，容易把细胞洗掉？
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发表于 2012-2-2 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
忘说了，我的是ATCC高分化的PC-12细胞。

====================================================================

有人所分化的神经细胞不能传代，这样理解的话高分化的PC12细胞岂不也不能传代？
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发表于 2012-2-2 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是刚开始养这个细胞，还没有做到MTT，没用到96孔板，但是看文献上都是要加完MTT后4小时弃去上清液，再加DMSO,我也不知道，未分化是半悬浮细胞，肯定有漂浮的被弃去，那样测的值就不准，但看有的文献说有专门离心96孔板的机器，这样离心后弃去上清液，细胞就不会损失了。还有一种说法是对于悬浮细胞可以做WST-1，来代替MTT,可以不用弃去上清液，
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flower-201[使用道具]
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发表于 2012-2-2 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

恩，一般分化的都是用NGF诱导的。有的文献里是自己诱导的，有的是直接买分化的。你可以先选择一种做做，如果顺利的话就不用换了，我的高分化PC-12很好养，一般按1:3传，两天就可以传一次。而且高分化的不用加马血清。
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发表于 2012-2-2 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #9 flower-201 的帖子

你好，我从我们这其他实验室借到了PC12细胞，是贴壁的，刚开始没仔细观察，觉得细胞都是一个个的，细胞身上有短突出！后来传了两次代，发现细胞与细胞的胞体间有细丝相连，还有一些大的粗的丝，还以为长霉菌了。如果长霉菌的话应该培养基很快变混，但培养基还清亮，我想问一下，您培养的高分化的PC12细胞是不是细胞之间也有很多细丝相连？希望您能回复！谢谢！
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