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标题:[求助]请教Sigma公司Ⅰ型胶原如何溶解，急

ha111[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]请教Sigma公司Ⅰ型胶原如何溶解，急




我购买了Sigma公司Ⅰ型胶原，Collagen
from bovine achilles tendon。 我用0.2%的乙酸配制成1mg/mL但却不能全部溶解,请哪位多多指教
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glass[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我购买了Sigma公司Ⅰ型胶原，Collagen
from bovine achilles tendon。 我用0.2%的乙酸配制成1mg/mL但却不能全部溶解,请哪位多多指教

===============================

用1640培养基（不含血清）来溶解
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junjie05[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
溶解的时间不够，我们用0.2%的乙酸配制成6－8mg/mL在4度下需要48小时溶解。另外要注意，溶解前尽量把胶原撕碎。
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果不行，可以试试冰浴超声。不过溶解后还是程浑浊状态，但过滤除菌成澄清状态。不知道是不是把营养有用的东西给滤了。
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发表于 2012-2-4 11:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问用1640培养基（不含血清）溶解的话需要什么样的条件，具体应该如何进行，请多指教
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我购买的是我使用的Ⅰ型胶原是Collagen from bovine achilles tendon，不是来自鼠尾胶原，不知道它是否可以用于细胞培养，另外溶解时温度应该控制在室温还是4度，若溶解后进行过滤除菌对溶液成分是否有影响？多谢。
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我都是用D-Hanks液溶解，很好溶。如果你用得平衡盐溶液是D-Hanks的话。
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我都是用D-Hanks液溶解，很好溶。如果你用得平衡盐溶液是D-Hanks的话。

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请问用D-Hanks液溶解的话需要什么条件，比如浓度、温度、时间，另外你溶解的也是这种牛跟腱胶原吗
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-2-4 11:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没有什么特殊的要求，配好之后要过滤，常温配制就行，浓度是0.1％，我的是这个浓度，不知道你的要求是什么。
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wsll[使用道具]
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发表于 2012-2-4 12:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

,1640 1代+碳酸氢钠 1.8 + heps 2.0 配好后 将胶原酶按0.1%~0.3%浓度,我用的是0.15%.常温下溶解,很好溶的 配好后过滤除菌即可用
最好不用 hank's或 D-hank's 因可影响胶原酶活性
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