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标题:[求助]细胞培养时过度烧瓶口和移液管会有什么后果？

c86v[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞培养时过度烧瓶口和移液管会有什么后果？



每次细胞培养总是很小心，为什么细胞总是污染，即使不污染，细胞总是感觉状态不好。我的培养液和培养皿都是进口的，应该没问题。我把瓶口和移液管已经烧的很烫了。谁能帮我分析原因？
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

和烧得烫不烫没关系。污染还要找别的原因。有时操作速度尽量快些，烧个没完没了没多大用处。
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33号[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞培养可以污染的环节太多，包括从液体的配制道最后的接种。
关键是养成很好的无菌操作习惯。
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泡泡[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞状态不好？
没有必要烧得很烫把
稍微烤一下就可以了
会不会使你每次移液前靠得太热又没有足够冷缺
吸取液体时温度太高
导致细胞温度过高受到损害呢
污染？
仔细分析每一步
比如移液管有没有倒置这样一些极细微的地方
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fklo83[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以前﹐在國內時﹐也總是燒來燒去。但現在﹐連換液都懶得用吸管﹐只要到出部份舊液﹐然後加上新的﹐就OK。還從不污染。我覺得中國的環境是有問題﹐處處充滿了細菌。而德國這個地方﹐真的空氣中很少細菌。在國內﹐不論在武漢時﹐還是在北京﹐經常感冒吃藥。出國前﹐還特意買了好多抗生素。可來到這裡近半年了﹐從來沒長過病﹐直到昨天找衣服時才發現了那些藥。這裡的超淨臺從不用紫外線﹐只要用前吹5分鐘就OK了。
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jujuba[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那也是因为你呆的时间短。一般在国内出来的，在空气干净的国家里，抗体会维持约两年。过了两年，该得病还得病。现在觉得好，等回国了就要打疫苗了。其实现在国内的实验条件也很好了，一般的学校里都建得起无菌室，无菌室里的细菌数也要达到标准DI。我记得我在两三年前在无菌室里养细胞就基本不用烧了，那还是两三年前呢，现在可能更好了。
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发表于 2012-2-4 16:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

新手？老革命们可不会这么干的。
将瓶、管烧烫作用不大，反而有可能将移液管中残留的培养液烧变性，如果不小心将这些废物再转移到培养瓶中，对细胞生长是不利的。
培养细胞随时要注意无菌操作，每一步操作不当都有可能造成细胞污染，多看书，会对你有很大的帮助的。
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发表于 2012-2-4 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我不认为国外实验室的的条件就比国内的绝对的好，
许多老外到我们这里，都认为我们的条件不比他们的差。
但是我们这里的无菌间都是按照常规紫外消毒，穿无菌衣。。。。。
这是一个常规，我相信在任何一个细胞培养书（老外写的）都是这样写的。
当然国外的外界环境是比国内干净，但是即使是这样严格按照无菌操作技术也是不能少，把偶尔的事件看成常规是不可取的。

我坚信严格按照无菌技术操作走到那里都不会错！
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BUK[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是中国人，我热爱我的国家，包括空气里的细菌，它增强我的体质，提高我的免疫力（Lauener RP, Birchier T, et al. Expression of CD14 and Toll-like receptor 2 in farmers’ and non-farmers’ children. Lancet 2002; 360:465-466.）。
我想只有那些免疫力有缺陷的才向往无菌的温室（比我养的海马神经元还娇气，不如住进我的二氧化碳孵箱吧。）。
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BUK[使用道具]
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发表于 2012-2-4 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

试管、滴管等使用之前烧一下是必要的，但一旦接触培养液或其他有机物质后最好不要再烧，正如老园丁所讲，蛋白高温变性后可能会对细胞造成伤害。

应该学会用酒精灯，它决不仅仅是用来烧东西的，更重要的是用它为为我们的操做撑起一把保护伞，因此我们的操作应尽量靠近灯焰。我们实验室超净台内的空气是由里向外流动的，因此灯焰向外倾，每次换液时把细胞放在灯焰下我很放心。
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