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标题:[求助]迁移试验

loli[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]迁移试验




明天要做迁移试验，请教各位老师：贴壁细胞由上是室转移到下室后，是贴在微膜上还是掉在溶液中？如果用趋化因子的话，一般迁移过来的细胞数量有多少，计数板计数能行吗？谢谢
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
贴壁细胞由上室转移到下室后，是贴在微膜上，若迁移时间长了就穿过膜后掉在溶液中了．迁移的细胞数与用的趋化因子及细胞迁移时间都有关系，没有数量的界定．因为细胞迁移后在膜下室和下层溶液中都有，因此也不能用计数板计数了．做迁移实验时通常设对照组，实验组与对照组在相同的迁移条件下，比较实验结果就行．
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loli[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 yueban-1147 的帖子

可是实验组和对照组如何比较呢，比较他们什么参数？
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

将穿过膜到小室外表面的细胞固定，染色后，在20×或40×物镜显微镜下计数每个视野中的细胞数目，多数几个视野，比较不同组细胞的平均值，也就是比较在相同条件下不同组细胞迁移到小室外表面的细胞数，代表了细胞的迁移能力。
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loli[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 yueban-1147 的帖子

谢谢你的指点。我还是有点不明白，贴壁细胞是贴在上室的底部的，当它们迁移过膜（没有铺侵袭试验用的基质胶），经染色后怎么能区分出是上室还是下室的细胞？多谢
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你可以在本论坛找一下迁移实验的步骤，是要把上室的细胞用棉签擦去的。
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daod[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问做迁移实验是不是要在上室中铺上明胶啊？
做侵袭性实验时要铺上Matrigel基质胶吗？
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orangecake[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问做迁移实验是不是要在上室中铺上明胶啊？
做侵袭性实验时要铺上Matrigel基质胶吗？
以前的贴子上说“做侵袭性实验时要铺上Matrigel基质胶”，只是我还不清楚做迁移实验时用fibronectin好在哪里，不用能不能做出结果？请高手指教
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