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[求助]THP-1悬浮细胞培养

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-2-10 17:22    作者: wu11998866    来源: 分析测试百科网

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[求助]THP-1悬浮细胞培养


实验才进行了几个月，发现本来养好了的细胞又开始不好了，我养的是THP-1悬浮细胞，以前是隔三天就吸出3分之1的液体，换上同样量的培养基（培养基和血清已混合），三天就可以 传代了，可是现在5天都不敢传代，细胞根本就不怎么长，培养基颜色也没有变黄，有的人说悬浮细胞要定期离心，我之前也试过，每次离心之后，细胞就会变形，长得非常难看，所以我一直就不离心，前几天因为实验的要求，我想给细胞更换新的培养基，于是就决定再试着离心一次，可是自从离心之后细胞就开始不好，里面的碎片也有不少，THP-1悬浮细胞究竟 有没有必要离心传代？如果 传代是否需要吹打均匀？因为我传代时不怎么吹打的，但是现在看细胞就有成团的现象。不知道有没有哪位大虾能够指点迷径阿？
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最新回复

  • mickeylin (2012-2-10 17:22:49)


    如果细胞活性好，2～3天肯定可以传代。细胞培养基一旦偏酸，要及时传代，否则很快贴壁，就很难再恢复原先的活性了。

  • 彼岸花opp (2012-2-10 17:23:15)


    这个细胞离心可以吧,转速不要太大!应该吹散吧!是不是培养液太久了!

  • vvmmoy (2012-2-10 17:23:38)

    同意二楼群友的说法，THP-1适宜在偏碱性环境（PH7.5左右)生长，对数生长期基本上24小时翻倍。不要等变黄，培养液偏酸就不好了。实在碎片多了还是可以离心的，1000转3分钟就可以，不多的话，可以在培养箱中把培养瓶站立放置半小时，让细胞沉淀在底部，吸去上层液体，更换培养液。贴壁不多可以轻轻吹打。多的话就更换培养瓶，另外注意，培养瓶要用塑料的，千万别用玻璃瓶，不然贴壁很厉害

  • wu11998866 (2012-2-10 17:24:04)

    谢谢大家，to l2001iu:你的THP-1怎么不是均匀分布的，你照片里好像是一团o哦。
    不是塑料瓶更容易使细胞贴壁吗？原来THP-1适宜在碱性环境中生长阿，我一直以为偏酸性环境对细胞生长好一些。明天给它换液，采用你们提供的方法，还是要离心，今天我去看了一下，真的很难看哦，好多碴碴 。

  • hot_hot_hot (2012-2-10 17:25:09)


    THP-1属单核细胞系，有单核细胞粘附玻璃的特性。

  • wu11998866 (2012-2-10 17:25:29)


    谢谢，那我明天换一下培养瓶。可是我就担心 我的细胞是不是能够恢复活性阿

  • 04906 (2012-2-10 17:25:51)

    均匀分布或是是一团，是与细胞状态有关的，我的经验是状态好，细胞密度不高时会抱团，呈现莹亮的葡萄串状，证明它在生长。

  • zhezhe (2012-2-10 17:26:10)


    但是我感觉我的ＴＨＰ－１基本是偏酸性时长的更好。

  • one (2012-2-10 17:26:27)


    THP-1悬浮细胞必须应用进口胎牛血清培养，细胞确实是抱团生长，体积很小。另外你的细胞可以冻融一次，可能细胞状态会恢复

  • 缘yuan (2012-2-10 17:26:48)


    必须进口胎牛？我用的是国产小牛，长的很好

  • 3648755 (2012-2-10 17:27:08)


    还有个可能性是 楼主可能传代太多了

    细胞代数过多，活性也会大打折扣的

  • fei1226com (2012-2-10 17:27:28)


    我是用进口胎牛血清，并添加谷氨酰胺，细胞疯长

  • SN0905 (2023-12-22 13:35:02)

    我想在悬浮培养第1,2,3天分别收集悬浮细胞做WB，这期间是不是需要换个液呢？悬浮细胞铺在6孔板里了该怎么换液哇？
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