小中大这个细胞是比较难养,长的慢,一般一星期才可以传一代,而且密度也不大,标准的应该是圆型,无棱角的,出现棱角的细胞说明已经开始分化。加双抗不影响,抗生素毕竟是为了避免细菌污染对真核细胞损害基本无,不然人怎么可以用抗生素治疗。此外,该细胞贴壁不牢,可以说是半贴壁细胞。所以看到许多人对采用直接吹打不消化,我个人认为还是会造成一定机械损伤。所以我是采用0。25%胰酶+0。02%EDTA消化30s,倒去消化液,加新培养基轻轻吹打开。消化时间不长但可以分离细胞,便于更好生长。
没有图不好判断你细胞的状况,所以上图更好说明问题。