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标题:[求助]SH-SY5Y细胞培养问题

moonlight45[使用道具]
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[求助]SH-SY5Y细胞培养问题




最近实验室要用一株神经细胞做实验,原代培养太麻烦,所以选择了SH-SY5Y这株细胞,从上海细胞所购买回来了,培养状态一直很差,用DMEM/F12培养基,没添加额外的L-Gln和双抗,仅添加了10%的FBS,细胞长得很慢,而且漂浮的很多,第一天换了液体,第2天看,又有很多细胞漂浮。园子里有哪位养这细胞的大侠传传经验啊!
或者,是上海附近有人养这株细胞的,我们可以换或购买这株细胞。目前我们实验室仅有KB,A549,HEK293,HEK593T,HeLa细胞。
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ladyhuahua[使用道具]
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这个细胞是比较难养,长的慢,一般一星期才可以传一代,而且密度也不大,标准的应该是圆型,无棱角的,出现棱角的细胞说明已经开始分化。加双抗不影响,抗生素毕竟是为了避免细菌污染对真核细胞损害基本无,不然人怎么可以用抗生素治疗。此外,该细胞贴壁不牢,可以说是半贴壁细胞。所以看到许多人对采用直接吹打不消化,我个人认为还是会造成一定机械损伤。所以我是采用0。25%胰酶+0。02%EDTA消化30s,倒去消化液,加新培养基轻轻吹打开。消化时间不长但可以分离细胞,便于更好生长。
没有图不好判断你细胞的状况,所以上图更好说明问题。
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盼盼[使用道具]
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我也是刚从上海细胞所买回来的SH-SY5Y,状态奇差,而且不是圆的,有棱角是吧,难友啊
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qumm1985[使用道具]
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神奇!我们买回来很久了,就是一直养不好,而且发现有不少的细胞都分化了。

求教!
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jujuba[使用道具]
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这种细胞我也刚刚养,目前看起来长的还可以,明天打算传代
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jujuba[使用道具]
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解冻后加的15%的FBS,也加了双抗和谷氨酰胺。
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我也刚刚在养这个细胞,感觉这个细胞很好养,传代很快,一般在2天左右,细胞不是圆形,而是有棱角,上传两张请战友们鉴别鉴别,提提意见


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再补充一下从ATCC细胞库里查到得SH-SY5Y的照片,不是圆形的,而是长梭型和棱形


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我现在也在养该细胞,细胞形状和caga发的图片差不多,但是我这里细胞长的也是很慢,传代后大概也是一周才能长满,不知caga同仁是怎么养的,使细胞长的那么快?希望大家交流下,谢谢!
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