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标题:[求助]这是内皮细胞吗？

fklo83[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]这是内皮细胞吗？




各位群友：
我刚开始原代培养大鼠微血管内皮细胞，一瓶刚传代，今天传代第三天，并没有形成典型的铺路石样，形状多为不规则梭形，请大家帮我看看，这是内皮吗，还是有成纤维细胞的可能呢？请大家不吝赐教！（第二页有我重新培养的图片）


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2012-2-11 12:20
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

单纯从形态上看，你养的细胞更像成纤维细胞，有条件你可以鉴定一下，做个免疫组化。附图为内皮细胞，你参考一下。


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fklo83[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

非常感谢！另外，我想问一下，内皮细胞在生长的过程中，是不是有长成梭形的呢，做免疫组化的话，除了八因子，CD31、CD34、VEGF-R中可以优先做哪个呢？
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生物迷[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
成纤维细胞不是一种，是一类，其中就包括了血管内皮细胞。

我觉得你这是内皮细胞，从你的图片上看的话很像是内皮细胞。可能是因为还没有完全长好或者细胞状态不良。

当内皮细胞在营养不足的条件下或者是受到某些刺激的时候（比如冻存的时候冻存液不好或者复苏的时候等等）细胞状态就会不良，比较难恢复。
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fklo83[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 生物迷 于 2012-2-11 12:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
成纤维细胞不是一种，是一类，其中就包括了血管内皮细胞。

我觉得你这是内皮细胞，从你的图片上看的话很像是内皮细胞。可能是因为还没有完全长好或者细胞状态不良。

当内皮细胞在营养不足的条件下或者是受到某些刺激的时 ...


非常感谢楼上群友的意见，有文献说内皮细胞8-10天可汇合成片，我的细胞已经长满10天了，如果是细胞状态不良，有什么补救措施吗？谢谢
再发一张，虽然很希望是内皮细胞，但是我自己觉得还是像成纤维细胞多，郁闷中


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guagua[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得不像是内皮细胞
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发表于 2012-2-11 12:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我看有周细胞混杂，你比我强多了，我也正在养原代大鼠视网膜内皮细胞与周细胞，我第一次取了眼球，到现在7天了，一个细胞也没见着，哪里出问题了，请问您是第几天开始换液，您的培养瓶包被了吗，培养基里加什么了，肝素，内皮生长因子等等都加了吗，血清浓度是多少啊，非常感谢。
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发表于 2012-2-11 12:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很难说，还是鉴定一下保险，我养原代内皮细胞的时候也是这个样子，因为长的时间长所以状态也不好就看着形态奇怪，只有细胞密了才看着想铺路石样。
祝一切顺利！
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fklo83[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
其实我养的是肠道微血管内皮细胞，并非你的大鼠视网膜内皮细胞与周细胞，我的培养瓶没有包被，（不过师兄建议用人纤维连接蛋白包被，我准备下一批试试），加了肝素与内皮细胞生长添加物，FBS的浓度是15%，不知道对你是否有帮助，祝顺利！
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谢谢各位群友，虽然觉得很不像内皮，但是还是决定做一下免疫荧光，八因子的抗体还没到，过两天先借师兄鉴定内皮组细胞的的VEGFR、CD34试一下。
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-2-11 12:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也培养微血管内皮细胞培养，做了2次，都没有培养出细胞，比你更郁闷！！
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