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标题:[求助]Hela细胞出现问题，请高手指点

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发表于 2012-2-11 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]Hela细胞出现问题，请高手指点




Hela细胞，8月从北京购得，第一批养的时候状态都不错，如图


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发表于 2012-2-11 17:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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发表于 2012-2-11 17:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
X400

但是最后一次培养和最近这几批复苏的，Hela细胞的状态就不好了。1640培养基每天跟换一次，但是第二天培养基基本上就变黄，摇晃时可见白色细沙样的沉淀物，时间越长越多，但培养基不是那种明显的混浊状。镜下细胞如图所见

X400
细胞圆缩？胞质内颗粒增多，部分细胞已失去正常形态，细胞拉丝明显，细胞间质内倒是没见明显的感染物
做过革兰氏染色，未见菌体。
请教各位园里的高手，我的hela是咋的啦？着急呢，赶着要毕业，但是细胞却养不出来！


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发表于 2012-2-11 17:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞也是，，，正在被困扰中，，感觉细胞边缘像被虫子啃了一样，仔细看培养液有黑色小虫游动，，培养液不混。。。目前被是黑胶虫还是洋葱伯克霍尔德还是支原体污染搞疯了，，，有人解决了麻烦告诉我下好么
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-2-11 17:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 131415 于 2012-2-11 17:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')



Hela细胞，8月从北京购得，第一批养的时候状态都不错，如图

培养基变黄，白色细沙沉淀物等现象来看应该是细菌污染，换液时可试着用双抗洗，看效果如何！
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发表于 2012-2-11 17:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 yueban-1147 的帖子

请问，换液时直接用双抗原液清洗？？还是用培养基配制的？？
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-2-11 17:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果污染了，用抗生素是没有用的
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发表于 2012-2-11 17:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细菌污染一般培养2－3天后能看到培养液明显混浊，镜下也能看到密布的细菌颗粒，你这个看上去也有可能是支原体污染，可以在培养液里加环丙沙星试试，100ml培养液里加1mg环丙沙星。
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-2-11 17:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #7 milkdog 的帖子

在没有其它好方法的话，可以试试，不是很严重的话还是有较明显的好处的~根据污染程度，用双抗的PBS稀释液（2%）浸泡1-5分钟，然后换新的培养基即可。
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 小中大

真菌污染了
白色絮状物
这个比较难挽救的
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