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标题:[求助]用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间?

00无名指00[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间?




用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间?消化温度是多少?可以放到培养箱里消化吗? 谢谢各位指教
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第一个问题因细胞而异如成纤维细胞很好消化（一分钟），而上皮细胞对胰酶很赖受，要很长时间。
消化温度一般室温，也不能太低，25以上吧，为了加快消化可以放在培养箱内，但是我们没有这样，就在室温，边消化边观察，细胞开始变圆，就终止了。放在培养箱里不方便观察。
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二丫头466[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

心肌细胞只要0.25的酶，2-3分钟即可，不用放入培养箱
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caihong[使用道具]
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 小中大

胰酶消化贴壁细胞一般消化3-4分钟，消化温度是37。可以放到培养箱里消化
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tieshazhang[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果需时较长，放在培养箱里，否则没必要。
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plaa[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

根据细胞而定了，建议一边消化一边观察，我养的是VSMC，用的是胰酶和EDTA消化 ，室温下1-2分钟就可以了。
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nn255[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的骨髓干细胞消化的时候，有的细胞已经悬浮起来了，但还有很多却还是伸展的很开的，低倍镜下可以看到很须状物，吹打的时候很多细胞吹不下来，传代后又可以看到很多细胞碎片，细胞的密度也不高，不知道是不是吹打时间太长细胞都死了还是怎么回事，但是吹的时间不长细胞又下不来，不知道什么原因
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发表于 2012-2-18 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般不超过3分钟,我养的HepG2曾创下13分钟消化记录.我是常规放孵箱的,没必要常常观察的.不过还是根据你养的细胞特性和胰酶活性决定.
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用胰酶消化时间一般根据细胞的不同而不同，有时还与细胞状态、胰酶配制的时间、温度有关，不能确定具体要多久时间。但同一种细胞、同样的条件下消化时间基本相同。
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-2-18 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我完全同意同仁的意见:用胰酶消化时间一般根据细胞的不同而不同，有时还与细胞状态、胰酶配制的时间、温度有关，不能确定具体要多久时间。但同一种细胞,培养时间长短不同时,消化时长也有异.边消化边观察,这点很重要.
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