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标题:[未解决]TLC检测为什么和HPLC不一致呢,很纳闷

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
owoo[使用道具]
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TLC检测为什么和HPLC不一致呢,很纳闷

请问各位有没有遇到过这样的情况:有A和B两种物质,
TLC检测时在254nmUV条件下,B有很强的吸收,可是A几乎看不到,
可是在HPLC检测时254nmUV检测器下,却是A的吸收很强,B的几乎没有,
而且我也确定A和B的出峰位置没有颠倒,不知道是怎么回事啊,
真是郁闷啊,不知道以哪个检测为准 恳请各位指教!
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  • miracle   2009-4-28 10:25  可用分  +2   欢迎您常来antpedia.com提问 解答问题 ...
  • miracle   2009-4-28 10:25  专家分  +3   欢迎您常来antpedia.com提问 解答问题 ...
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uovt69jn[使用道具]
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一般情况这两种应该是一致的对吧  应该是TLC上吸收强的HPLC上的峰面积会很高的吧
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  • miracle   2009-4-26 20:02  专家分  +3   谢谢您的解答回复
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NVIDIA[使用道具]
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首先,你确定在HPLC上你用的是什么柱子,流动相和薄层的洗脱上用的是否一致,液相上常用的c18柱是反相柱,可以从液相分离的原理思考这个问题。
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  • miracle   2009-4-27 14:52  专家分  +3   谢谢您的帮助
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owoo[使用道具]
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可以具体一点吗?液相分离的原理?是说反相柱的极性原理一般与TLC的极性相反吗? 恩如果是说AB的出峰时间这个我用A的单一物质跑过HPLC,所以确定它们没颠倒,如果不是这个原因,还请指教一下,怎么用液相分离的原理考虑呢?
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zhanghuihui[使用道具]
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TLC检测时极性小的在上,极性大的在板的下面
而HPLC用的反相柱是极性小的后出,极性大的先出。
应该分别拿到纯产物,看保留时间再确定,你先前测的说不定是偶然
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  • miracle   2009-4-28 19:16  专家分  +4   十分感谢您的热心解答
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maicaixiaogu[使用道具]
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TLC一般是正相的,HPLC一般是反相的,出峰时间会不同
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  • miracle   2009-4-29 11:36  专家分  +3   感谢您的大力支持
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