小中大1 我用的培养基是M199的，如果你想用DMEM，可以用一般的，我的细胞分下来就直接加无血清平培养基，我不要求它贴壁。另我的培养基中还补加了BSA、胰岛素、肉毒碱等物，这是按国外文献补加的，好像效果也一般。我们这有人直接用无血清DMEM培养也可以。
2 这个贴壁培养的模型本身就只是在贴壁时加血清，浓度大约5－15％，胎牛的，贴壁后直接换成无血清的。因为成熟心肌细胞不增殖，血清中的某些因子可促进它的凋亡，而且加血清后，细胞伸出伪足，形态与在体时不一样了。所以，如果你要研究形态最好不要加血清。如果你的细胞贴壁很好，换液时直接倒掉就可以了。如果不行，就把瓶子放在超净台中，自然沉降，轻轻去上清即可。不用离心管。尽量不要吹打细胞。
3 KB中保存时不用充氧。
4 我的M199培养基钙浓度是2.2mM/L，因此，我将它与0Ca液相混，配成不同浓度的钙液。我一般用1/20, 1/10, 1/5, 1/3, 1/2, 3/4, 最后全换成M199，完成复钙。你也可以自行设计，不过尽量慢一点。有人一共就分3－4步，效果也可以。
注意：所有要用的溶液，最好用去离子水配制，这样效果好些。
